临床医学本科医学微生物学试验教学大纲.docVIP

医学微生物学实验大纲 （适用于临床医学本科专业） 大纲说明 　　　医学微生物学是一门实践性很强的学科，不仅要掌握理论基础知识，还需要掌握微生物学的实验技能。通过实验以验证课堂所讲的理论，以便使学生加深和巩固对课堂所讲的内容的理解和体会，掌握微生物学的基本技能，树立无菌观念，为学好临床及基础医学有关学科打下基础，并有利于培养学生科学思维和独立工作能力，提高学生的综合素质。 为了提高实验课的效果，要求学生在实验前后应做到下列几点： 1、每次实验前务必作好预习，明确实验目的、内容、操作中注意事项及其理论依据等，避免错误的发生。 2、在实验的过程中，要坚持严肃性，严格性与严密性。对操作的实验应遵照实验指导所列步骤依次进行，对示教的实验，也要仔细观察并联系有关理论，在实验中尤其要注意科学地分配和运用时间。 3、实验结果必须真实地记录下来，然后进行分析，得出结论。遇有和理论不符合的结果时，应尽量探讨其原因，训练自已和科学思惟。实验完成后要写出实验报告。 细菌的形态与结构 第一次实验 （2学时） 实验内容： （1）显微镜油镜的使用和保护；（2）细菌形态结构及运动观察；（3）细菌涂片标本制作及革兰氏染色。 目的要求： 学会显微镜油镜的使用和保护；掌握细菌的基本形态和特殊结构；掌握细菌涂片标本制作及革兰氏染色法；了解细菌动力的检查法及其意义。 实验方式：（1）显微镜油镜的使用与保护（讲解、示教）（2）细菌形态结构及运动的观察（个人操作）1、细菌的基基本形态（观察葡萄球菌、绿脓杆菌、霍乱弧菌的革兰氏染色标本片）2、细菌的特殊结构（观察肺炎球菌的荚膜，伤寒杆菌的鞭毛，破伤风杆菌的芽胞）3、观察细菌的运动（压滴法，观察绿脓杆菌的运动）（3）细菌标本的制作及革兰氏染色法1、标本涂片制作（用葡萄球菌和绿脓杆菌的斜面培养物涂片）2、革兰氏染色法（初染、媒染、脱色、复染、油镜观察结果）。 细菌的生理 第二次实验 （2学时） 实验内容：1、 基础培养基的制备 2、 细菌的培养法 目的要求： 了解常用的液体、固体、半固体培养基的成分，制备方法和用途；初步掌握细菌分离培养及纯培养接种技术。 实验方式： 基础培养基的制备 1、液体培养基的制备（讲解方法、步骤、示教PH测定） 2、固体培养基的制备 1）普通琼脂培养基（琼脂平板和琼脂斜面）2）血液琼脂培养基 （血平板和斜面） 3、半固体培养基的制备 细菌的培养方法　　1、分离培养基——平板划线法（讲解、示教操作、小组操作、葡萄球菌和大肠杆菌混合液） 2、纯培养——斜面、液体、半固体培养基接种法（小组操作）1）斜面培养基接种法（双糖铁培养基、大肠杆菌斜面培养物）2）液体培养基接种法（单组——大肠杆菌；双组——枯草杆菌培养物） 3）半固体培养基穿刺接种（单组——大肠杆菌、双组——葡萄球菌培养物） 问题： 1、培养基的制备过程可概括为哪几个步骤？ 2、如何识别琼脂板上的菌落是接种上去的，还是杂菌污染？ 第三次实验（2学时） 实验内容：1、细菌代谢产物的检查 2、细菌呼吸酶 3、细菌的分布 目的要求：了解糖分解，硫化氢产物、靛基质生成等生化反应的实验方法及其实际间谍；观察细菌在培养基上产生的色素；了解细菌呼吸酶的检查方法、原理、用途及该酶在细菌代谢中的功用；证明自然界和正常人体均有许多细菌存在，以树立严格的消毒和灭菌观念。 实验方式： 1、细菌代谢产物的检查（小组操作）（1）糖发酵试验（单糖——示教；双糖铁培养基——小组操作，大肠杆菌，伤寒杆菌和乙型副伤寒杆菌培养物）。（2）靛基质试验（蛋白胨水培养基，大肠杆菌、伤寒杆菌、乙型副伤寒杆菌培养物）。（3）硫化氢试验（醋酸铅培养基，大肠杆菌、伤寒杆菌、乙型副伤寒杆菌培养物）。（4）色素产生试验（示教、葡萄球菌和绿脓杆菌色素）。 2、细菌呼吸酶的检查（小组操作）（1）细菌脱氢酶的检查——美兰还原试验（大肠杆菌接种于肉浸液培养基中）。（2）过氧化氢酶的检查（大肠杆菌接种于肉浸液琼脂斜面） 3、细菌的分布（小组操作）（1）空气和水中细菌的检查（分室内、室外、空气检查，污水和净水中细菌的检查）。（2）皮肤及飞沫中细菌检查（分消毒皮肤和未消毒皮肤，飞沫细菌检查用血平板）。 问题：1、仅根据一种生化反应的结果，能否将两种不同的细菌区别，为什么？2、在微生物实验中，怎样才能避免杂菌污染？3、飞沫细菌检查为何要用血琼脂平板？ 消毒与灭菌、遗传与变异 第四次实验（2学时） 实验内容：1、物理灭菌法 2、化学消毒剂的作用 3、细菌的遗传与变异 目的要求：初步掌握高压蒸气灭菌器的使用方法及注意事项；证实煮沸消毒方法和紫外线钉菌的效果，并了解影响其效果的因素；证实常用消毒剂的抑菌作用；了解细菌的遗传与变异原理，方式及实用意义。 实验方式： 1、物理灭菌法（1）高压蒸汽灭