蛋白质合成教学课件.ppt

U A G 5 3 RF COO- 蛋白质的合成是一个高耗能过程： AA活化 2个高能磷酸键（ATP） 肽链起始 1个（70S复合物形成，GTP） 进位 1个（GTP） 移位 1个（GTP） 终止 1个 GTP→GDP 第一个氨基酸加入需消耗3个（活化2+起始1 ） 以后每加入一个AA（形成一个肽键）需要消耗4个 （活化2 + 进位 1个 + 移位1个）。 终止 GTP→GDP消耗1个 12.9 蛋白质修饰和定位 从核糖体释放出的新生多肽链不具备蛋白质的生物活性，必须经过不同的加工过程才能转变为有天然构象的功能蛋白。主要包括： 肽链一级结构的修饰 多肽链折叠为天然的三维结构 高级结构修饰 多肽合成虽然开始于一个N-甲酰蛋氨酸（细菌）或一个蛋氨酸（真核生物），但合成结束后都会经酶催化除去，不出现在最终功能蛋白质中。 在一些蛋白质氨基端都带有确定其最终位置的信号序列。在引导蛋白质到达最终目的地后被专一肽酶切除。 二硫键的形成，糖蛋白的糖基化，个别氨基酸的修饰，如氨基酸的磷酸化，乙酰化等。 （一）多肽链折叠为天然功能构象的蛋白质 新生肽链的折叠在肽链合成中、合成后完成，新生肽链N端在核糖体上一出现，肽链的折叠即开始。可能随着序列的不断延伸肽链逐步折叠，产生正确的二级结构、结构域到形成完整的空间构象。 一般认为，多肽链自身氨基酸顺序储存着蛋白质折叠的信息，即一级结构是空间构象的基础。 细胞中大多数天然蛋白质折叠都不是自动完成，而需要其他酶、蛋白辅助。 几种有促进蛋白折叠功能的大分子——助折叠蛋白 1. 分子伴侣 (molecular chaperon) 2. 蛋白质二硫键异构酶 (protein disulfide isomerase, PDI) 3. 肽酰-脯氨酰顺反异构酶 (peptide prolyl cis-trans isomerase, PPI) 1. 热休克蛋白(heat shock protein, HSP)： HSP70、HSP40和GreE族 2. 伴侣素(chaperonins) ： GroEL和GroES家族 分子伴侣 分子伴侣是细胞一类保守蛋白质，可识别肽链的非天然构象，促进各功能域和整体蛋白质的正确折叠。包括： （二）一级结构的修饰 1、肽链N端的修饰：去甲酰化、去蛋氨酰基 2、个别氨基酸的修饰：由专一性的酶催化进行修饰， 包括糖基化、羟基化、磷酸化、甲酰化等。 3、多肽链的水解修饰 （三）高级结构的修饰 1、亚基聚合 2、辅基连接 3、疏水脂链的共价连接 12.10 蛋白质合成后的靶向运输 蛋白质合成后需要经过复杂机制，定向输送到最终发挥生物功能的细胞靶部位，这一过程称为蛋白质的靶向输送(protein targeting ) 。 所有靶向输送的蛋白质结构中存在分选信号，主要为N末端特异氨基酸序列，可引导蛋白质转移到细胞的适当靶部位，这一序列称为信号序列 。 真核生物蛋白质的合成与经内质网的转移 蛋白合成开始 蛋白合成被抑制 恢复蛋白合成 除去信号序列 完成蛋白合成 核糖体解离 12.10 蛋白质合成的抑制剂 绝大多数已知的抗生素，包括已临床应用的抗生素可以阻断翻译。 嘌呤霉素：由链霉菌产生，其结构非常类似于氨酰-tRNA的3’末端的结构，与核糖体的A位结合。 当新生成的多肽转移至嘌呤霉素的游离的氨基上形成肽酰－嘌呤霉素后，终止蛋白质合成。 嘌呤霉素可以有效地阻止原核生物和真核生物的蛋白质合成，不能用于临床。 嘌呤霉素的作用机制 四环素可以和原核生物核糖体的30S亚基结合，封住A位点，阻止氨酰-tRNA进入A位。 氯霉素与50S的核糖体亚基作用，抑制肽酰转移酶，广泛用作治疗细菌感染的药物，但只限于严重感染。有很强的毒副作用。 链霉素抑制蛋白质合成的起始，也能引起肽链延伸阶段的mRNA的错读，改变细菌中翻译的忠实性。 本章主要知识点 遗传密码由三个不重叠的连续的三核苷酸密码子组成，共有64个密码子，其中61个编码氨基酸，三个为终止密码。 tRNA上的氨基酸臂连接着氨基酸残基，反密码子环上的反密码子通过碱基配对和mRNA上的密码子相互作用。 反密码子与mRNA中的密码子配对在5’位有一定的柔性。 一个氨基酸在氨酰-tRNA合成酶的催化下共价连接在tRNA 3’末端的AA残基适当的位置上。 本章主要知识