第二单元 酶化学酶促反应动力学11-9-1.ppt

下 课 * 3、利用作图法测定Km和 Vmax 值 (1)米氏方程双倒数作图法 Vmax . [S] ν＝—————— Km + [S] (2)由米氏方程直接测定 Vmax Vmax . [S] —— ＝——————， 所以 [S]=Km 2 Km + [S] 由米氏方程 可以看出,当反应速率达到最大反应速率的一半时, 三、酶的抑制作用 (Inhibition) (一)抑制程度的表示方法 (二)抑制作用的类型 (三)可逆抑制作用和不可逆抑制作用的鉴别 (四)可逆抑制作用动力学 (五)一些重要的抑制剂(Inhibitors) (一)抑制程度的表示方法 一般用反应速率的变化来表示酶受抑制后活力降低的程度.若不加抑制剂时的反应速率为v0,加入抑制剂后的反应速率为vi,则酶受抑制程度可用下列方法表示: 1、相对活力分数： a= vi/ v0 2、相对活力百分数： a%= vi/ v0× 100% 3、抑制分数：指被抑制而失去活力的分数 i = 1- a = 1- vi/ v0 4、抑制百分数： i%= （1- a） × 100% = （1-vi/ v0）× 100% （二）抑制作用的类型 抑制剂： 凡使酶的必需基团或酶的活性部位中的基团的化学性质改变而降低酶活力甚至使酶完全丧失活性的物质，称为抑制剂，用I表示，其作用称为抑制作用。 抑制作用一般分为: 不可逆抑制作用和可逆抑制作用两类。 1、不可逆的抑制作用 抑制剂与酶的必需基团以共价键结合而引起酶活力丧失，不能用透析、超滤等物理方法除去抑制剂而使酶复活，称为不可逆抑制（irreversible inhibition）。 2、可逆抑制作用 （1）竞争性抑制 （2）非竞争性抑制 （3）反竞争性抑制 抑制剂与酶的必需基团以非共价键结合而引起酶活力丧失，能用透析、超滤等物理方法除去抑制剂而使酶复活，称为可逆抑制（reversible inhibition） 竞争性抑制： 底物和抑制剂结合在酶的相同位点上。 英文 Reversible enzyme inhibitors： S and I bind to same site on E 中文 反竞争性抑制:  酶只有与底物结合后才能与抑制剂结合. 英文 Uncompetitive.  I binds only to ES (inactivates E) 中文 非竞争性抑制：  抑制剂既可以和酶结合又可以和酶与底物  的复合物结合，从而抑制酶的活性。 英文 Noncompetitive.  I binds to either E or ES to inactivate the enzyme 中文 0 [E] v 1 2 3 1、无抑制剂，2、不可逆抑制剂，3、可逆抑制剂 可逆抑制剂与不可逆抑制剂的区别（一） （三）可逆抑制作用与不可逆抑制作用的鉴别 可逆抑制剂与不可逆抑制剂的区别（二） v 0 [E] v 0 [E] [I] [I] 可逆抑制剂的作用 不可逆抑制剂的作用 增加 增加 (四)可逆抑制作用动力学 （1）竞争性抑制 （2）非竞争性抑制 （3）反竞争性抑制 竞争性抑制 英文 V= Vmax[S] Km(1+ [I] / ki)+[S] Vmax 不变 Km增加 ki 为抑制剂常数 V= Vmax[S] Km(1+[I] / ki)+[S] Vmax 不变 Km增加 Competitive inhibition. (a) Kinetic scheme. (b) Lineweaver-Burk plot 中文 反竞争性抑制 V= Vmax[S] Km+ [S](1+[I] / ki) Vmax 减小 Km减小 英文 Uncompetitive inhibition V= Vmax[S] Km+(1+[I] / ki) [S] Vmax 减小