流式细胞术讲义.ppt

?鉴别淋髓系列 ?区分亚型 ?双表型、杂合型 ? Mo、M7、AUL ?提示细胞遗传学异常 ? 部分与预后相关 ? MDR监测 AL免疫表型检测意义 Gating FCM设门法 FSC/SSC:不能将淋巴、单核及幼稚细胞区分开 CD45/SSC:CD45是WBC抗原,RBC.PLT为阴性。CD45在成熟细胞表达强，幼稚细胞表达弱。在淋巴，单核及粒细胞表达强度不同。 优点：能将淋巴单核及幼稚细胞区分开，特异分析白血病细胞免疫表型。 正常血细胞分化发育过程中免疫标志变化特点以及白血病细胞免疫标志特点 常用各系血细胞CD抗原 1、T系：CD1-CD8（CD6不用） 2、B系：CD10, CD19-CD24, FMC7 3、髓系：CD11b,CD13-CD16,CD33,CD64 4、干祖：CD34, CD117, CD38, HLA-DR 正常B细胞标志 CD19 CD22 TdT Cd34 CD10 CD20 FMC7 CD23 DR I期 + + + + + + II期 + + - - + -/+ + III期 + + - - - + + IV期 + + - - - + + + + 泛B标志：CD19,HLA-DR,cCD79a/CD22 幼稚B标志：CD34,TdT,CD10 成熟B标志：CD23,FMC7 B-ALL的分型 亚型 CD19 CD34 TdT CD10 Cylg SmIg 急性早期B前体细胞白血病 Early B-precursor ALL + + + + - - 急性前B细胞白血病 Pre B-ALL + -/+ + + + - 急性B细胞白血病 B-ALL + - - - -/+ + 正常T细胞标志：根据在胸腺内发育阶段分类 CD7 CD2 CD5 CD34 CD1a CD3c/m CD4 CD8 I期 + + + + +/- II期 + + + - + +/- III期 + + + - + +/+ + + IV期 + + + - - +/+ +/- +/- 泛T:CD2,CD5,CD7,cCD3 幼稚T:CD34,TdT,CD1a,CD4/8 成熟T:CD3,CD4,CD8 T-ALL的分类 分型 CD7 CD2 TdT CD3c/m 急性早期T前体细胞白血病 Early T precursor ALL + - + +/- 急性T细胞白血病 T-ALL + + - +/+ T-ALL特点： 1，幼稚T细胞数量增多：CD34+,TdT+↑ 2，泛T标志丢失 3，CD4/8双阳或CD4/8单阳 正常单核细胞标志 全单核细胞标志：CD33,CD13,HLA-DR 幼稚单核细胞标志：CD34,CD117 成熟单核细胞标志：CD14,CD64 HLA-DR CD33 CD13 CD34 CD117 CD14 CD64 幼稚单 + + + + + - - 成熟单 + + + - - + + 正常粒细胞标志 cMPO CD13 CD34 CD117 HLA-DR CD33 CD11b CD15 CD64 CD10 幼稚粒 + + + + + + + - - - - 成熟粒 + + - - - + + + + + 全粒细胞标志：CD13,CD33,Cmpo 幼稚粒细胞标志：CD34,CD117,HLA-DR 成熟粒细胞标志：CD15,CD11b,CD10,CD64 成熟粒、单核细胞主要区别 成熟粒细胞： CD33+ HLA-DR- CD14- CD64+dim 成熟单核细胞： CD33++ HLA-DR+ CD14+ CD64++ 干祖细胞标志 T祖细胞 B祖细胞 髓祖细胞 CD34 + + + TdT + + - CD117 -/+ - + HLA-DR +/- + + CD38 + +/- + 诊断白血病主要标志： B-ALL: CD34, HLA-DR, CD19, CD10+/-, cCD79a T-ALL: CD34, CD38, CD7, CD2+/-, CD5+/-, cCD3 AML: CD34, CD117, CD33, CD13, cMPO M3: CD34-, HLA-DR- M2: CD19+: t(8, 21) M4/M5: CD14+ M6: GlyA+, CD71+ M7: IIb/IIIa(CD41, CD61)+ 双表型急性白血病诊断的积分系统(EGIL,1998) 分值 B系