叶黄素的检测方法.docVIP

叶黄素的检测方法叶黄素的检测方法DD.1　仪器设备及化学试剂DD.1.1　容量瓶：100、50ml。DD.1.2　移液管：30、20、10、5。DD.1.3　水浴锅。DD.1.4　分析天平。 DD.1.5　分光光度计。DD.1.6　正己烷（分析纯）。DD.1.7　丙酮（分析纯）。DD.1.8　无水乙醇（分析纯）。DD.1.9　甲苯（分析纯）。DD.1.10　10%Na2SO4水溶液（W/V）：100克无水硫酸钠溶解在100ml水中。DD.2　分析步骤称取0.70克样品放进100ml容量瓶中。加60ml抽提剂（正己烷：无水乙醇：甲苯：丙酮??按10：6：6：7体积比的混合物），摇晃30秒，加上冷凝管（2mm×50cm的玻璃管）或直接胶塞塞住放进（56±1）℃水浴锅中加热10分钟。用冷水冷却至室温，不要去掉冷凝管或胶塞。用抽提剂定容，晃1分钟，放在暗处15分钟。取上清液10ml于100ml容量瓶中（容量瓶中已加入20ml抽提剂，30ml正己烷），用10%的硫酸钠水溶液定容至刻度，剧烈摇晃1分钟后放在暗处15分钟。取5ml上清液于50ml容量瓶中，用正己烷定容，晃匀。用正己烷做空白 474nm 尽快比色，测出吸光度。DD.3　计算? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?A474×5000×f叶黄素含量=? ?--------------------------? ?? ?? ?? ?? ?? ???? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ? 236×G式中：f=0.561 ；? ?　A474：苏丹Ⅰ工作溶液， 0.04mmol ；? ?? ?? ?G：样品质量，g 。DD.4　苏丹Ⅰ工作溶液（0.04 mmol）的制备DD.4.1　苏丹Ⅰ标准品苏丹1用无水乙醇再次结晶的标准品8g苏丹Ⅰ ，加300ｍL乙醇750C完全溶解，真空过滤，除去杂质，冷却结晶，再次过滤，700C真空烘箱烘至恒重。DD.4.2　苏丹Ⅰ浓缩液（1.0 mmol）苏丹1标准品0.1241克溶于丙酮，异丙醇（1：1V/V）混合液500ml中，避光贮存。DD.4.3　苏丹Ⅰ工作溶液（0.04 mmol）稀释至2ml浓缩液到50ml丙酮、异丙醇混合液，避光贮存。