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《DNA的粗提取和鉴定》教学设计
一、设计思想:?
???? “生物技术实践”课程的基本理念是提高学生的科学素养,而生物实验教学是培养学生科学素养的重要途径和方法。本实验的设计目的,一则是让学生通过实验建立自主探究的学习模式,一则主要培养学生的观察能力、动手能力等基本技能,从而提高学生的生物科学素养。
二、教材分析:
?????? DNA粗提取和鉴定实验是开展分子生物学研究的基本技术,可以帮助学生初步了解分子生物学的基本实验方法,巩固课本中有关DNA的理论知识。而DNA属于分子水平,学生对它的认识不是很直观,因此学生让亲自从细胞提取和鉴定DNA,不但可使学生学会有关方法和基本技能,还可以激发学生学习生物学的兴趣,加深对有关知识的认识。
三、教学设计:
【教学目的】
? 1、了解提取生物大分子的基本思路和方法
? 2、理解DNA粗提取和鉴定的原理
? 3、学习DNA得粗提取和方法
【教学重点】
? 1、DNA粗提取的原理和方法
? 2、DNA鉴定的原理和方法
【教学难点】
? 1、DNA粗提取的原理和方法
? 2、DNA鉴定的原理和方法
【课时安排】?? 1课时
【教学设计过程】
一、学习实验原理:
?? DNA的提取:?DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14mOl/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。?? DNA的提纯:DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。?? DNA的鉴定:DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
二、分析教学过程:
??? 要提取DNA并鉴定提取物是DNA,要解决的主要问题有:①DNA主要存在于细胞核中,如何选取具核的生物组织作为实验材料。②如何除去核膜和细胞膜,对于植物细胞又如何破壁。③细胞核中除DNA外,还有其他一些大分子物质,且DNA以核蛋白体的形式存在。那么,如何使DNA与蛋白质等其他的大分子物质分开。④如何去除杂质使DNA更加纯化。⑤如何验证提取物主要是DNA成分。我们教学的重点就是要以这些主要问题为引子,引导学生在思考这些问题的同时,巩固基础知识,利用这些知识,设计实验步骤。
三、实验设计:
? 通过原理分析,我们可将实验步骤归纳为 ①释放组织细胞中的DNA,②粗提取DNA,③将粗提取的DNA进一步纯化,④鉴定提取物是DNA
实验材料:理论上,凡是含有DNA的生物材料都可以考虑。
1、选材原则? 不同生物的组织中DNA含量不同,在选取材料时,应选择DNA含量高、材料易得、便于提取的材料。你认为提供的材料中哪些不适合提取DNA?(鱼卵、猪肝、菜花、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、菠菜、月季花叶等,学生还可以自己提出实验材料,对一些优秀的学生,可引导设计实验,探究实验最适合的材料)(哺乳动物的血液)
2、从核DNA数目来看,猪38条,鸡78条,哺乳动物血0条,猕猴桃58条,洋葱16条,豌豆14条,菠菜12条,大肠杆菌1条。请选择动植物材料各一种。——鸡血。
3、破碎细胞,获取含DNA的滤液
若选用鸡血和洋葱作实验材料,则怎样获取含DNA的滤液?(引导学生利用所掌握的知识设计操作步骤)(在鸡血细胞液中加入一定量蒸馏水并用玻棒搅拌,过滤后收集滤液;切碎洋葱,加入一定量洗涤剂和食盐,搅拌研磨,过滤后收集滤液。)
在以上实验中,加入蒸馏水、洗涤剂和食盐的作用分别是什么?过滤时应当选用滤纸、还是尼龙布?
(血细胞在蒸馏水中大量吸水而胀破;洗涤剂瓦解细胞膜;食盐溶解DNA物质;选用尼龙布进行过滤。)
在处理植物组织时需要进行研磨,其目的是什么?研磨不充分产生什么结果?
(破碎细胞壁,使核物质容易溶解在NaCl溶液中;研磨不充分会使DNA的提取量减少。)
(具体做法:10mL鸡血+20mL蒸馏水→同方向搅拌→3层尼龙布过滤→滤液)
4、除去滤液中的杂质:最初获得的DNA滤液含有蛋白质、脂质等杂质,需要进一步提纯DNA。根据三种方案提取并纯化DNA。
4、DNA析出与鉴定?:在滤液中仍然含有一些杂质,怎样除去这些杂质呢?得到的DNA呈何颜色?(滤液与等体积的冷却酒精混合均匀,静置2~3分钟,析出的白色丝状物就是DNA。DNA呈白色。)
怎样鉴定析出的白色丝状物就是DNA呢?简述DNA的鉴定过程。
(具体做法。试管2支,编号甲乙→各加等量5mLNaCl溶液→甲中放入少量白色丝状物,使之溶解→各加4mL二苯胺,混合均匀→沸
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