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2.(2018·长春模拟)如图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。请根据示意图回答下列问题: (1)单克隆抗体制备是________技术中最重要的用途。将特定的抗原注入小鼠体内,其目的是使小鼠产生________细胞。? (2)单克隆抗体的化学本质是______________;合成与分泌单克隆抗体涉及的细胞器是____________、______________、______________、____________。? (3)骨髓瘤细胞与某些淋巴细胞混合在一起,细胞融合完成后,在培养基中有________种两两融合的细胞,融合的方法除了电激外,还可以用化学诱导剂________或灭活的________处理。? 【解析】(1)单克隆抗体制备是动物细胞融合技术中最 重要的用途。将特定的抗原注入小鼠体内,其目的是 使小鼠产生浆细胞。(2)单克隆抗体的化学本质是蛋白 质,属于分泌蛋白,合成与分泌单克隆抗体涉及的细 胞器有核糖体、内质网、高尔基体、线粒体。(3)骨髓 瘤细胞与某些淋巴细胞混合在一起,细胞融合完成 后,在培养基中有三种两两融合的细胞,分别是瘤—瘤细胞,B—B细胞,瘤—B细胞。动物细胞融合的方法除了电激外,还可以用化学诱导剂聚乙二醇(PEG)或灭活的病毒处理。 答案:(1)动物细胞融合 浆 (2)球蛋白(或蛋白质) 核糖体 内质网 高尔基体 线粒体 (3)三 聚乙二醇 病毒 3.(2018·武汉模拟)如图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单克隆抗体的实验研究。据图回答相关问题: (1)X、Y、Z细胞的名称分别是_________、________、________。? (2)①过程类似于植物组织培养技术中的________过程。与纤维母细胞相比,诱导干细胞的全能性较________________。? (3)③过程中需用到的化学诱导剂是________。? (4)④处需要筛选,其目的是______________________ _________________________________________。? (5)用含32P标记的脱氧核苷酸的培养基培养Z细胞,细胞质中能测到32P的细胞器是________。? 【解析】(1)X、Y、Z细胞的名称分别是骨髓瘤细胞、 抗原刺激过的B淋巴细胞(或浆细胞)、杂交瘤细胞。 (2)①过程是将甲小鼠的纤维母细胞诱导成诱导干细 胞,相当于植物组织培养技术中的脱分化过程。与纤 维母细胞相比,诱导干细胞的全能性较高。(3)诱导动 物细胞融合,需用到的化学诱导剂是聚乙二醇。(4)将 Z细胞进行选择培养,才能筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。(5)脱氧核苷酸是DNA的基本组成单位,动物细胞的线粒体中含有少量DNA。 答案:(1)骨髓瘤细胞 抗原刺激过的B淋巴细胞(或浆细胞) 杂交瘤细胞 (2)脱分化 高 (3)聚乙二醇 (4)筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 (5)线粒体 【知识总结】制备单克隆抗体过程中的两次筛选 项目 筛选的对象 方法 第一次 筛选 杂交瘤细胞 利用特定的选择培养基:在该培养基中只有杂交瘤细胞能存活,其他细胞(未融合的B细胞和瘤细胞、融合后的B—B细胞和瘤—瘤细胞)均不能成活 第二次 筛选 能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 利用特定抗原通过抗原—抗体杂交技术确认抗体性质 【加固训练】 人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下面是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,请分析回答问题: (1)制备单克隆抗体过程中要用到________和________技术。 (2)制备单克隆抗体过程中,给小鼠注射的HCG相当于________,使小鼠产生分泌相应________的B淋巴细胞,此过程属于特异性免疫中的________免疫。 (3)在细胞内DNA的合成一般有两条途径,主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶的催化作用合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。 ①利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分,其中添加的________具有筛选?杂交瘤细胞的作用。 ②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是___________ __________________________________________。 (4)此过程生产的单克隆抗体可以与________特异性结合,从而诊断早孕。 【解析】(1)制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培 养和动物细胞融合技术。(2)给小鼠注射HCG,使小鼠 进行体液免疫,产生能分泌相应抗体的B淋巴细胞。 (3)骨髓瘤细胞的DNA合成只有一条途径,在培养
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