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2.(2018·东北三校联考)马铃薯是重要的经济作物,在基因育种方面取得丰硕成果。 (1)马铃薯是双子叶植物,常用________法将目的基因导入马铃薯受体细胞中。构建好的基因表达载体基本结构有:目的基因、________、________、________ ____、复制原点五部分。 (2)马铃薯易患多种疾病,导致产量下降。基因工程中常用的抗病基因为________(写一种即可)。 (3)科学家还培育出抗除草剂的转基因马铃薯,主要从两个方面进行设计: ①修饰除草剂作用的靶蛋白,使其对除草剂_________ ______,或使靶蛋白过量表达,植物吸收除草剂后仍能正常代谢。 ②引入酶或酶系统,在除草剂发生作用前___________ __________。 (4)将目的基因导入受体细胞后,还需对转基因植物进行__________________。 【解析】(1)马铃薯是双子叶植物,常用农杆菌转化法将目的基因导入马铃薯受体细胞中。构建好的基因表达载体基本结构有:目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点五部分。 (2)马铃薯易患多种疾病,导致产量下降。基因工程中常用的抗病基因为病毒外壳蛋白基因、病毒的复制酶基因、几丁质酶基因和抗毒素合成基因(写一种即可)。 (3)科学家还培育出抗除草剂的转基因马铃薯,主要从两个方面进行设计:? ①修饰除草剂作用的靶蛋白,使其对除草剂不敏感,或使靶蛋白过量表达,植物吸收除草剂后仍能正常代谢。 ②引入酶或酶系统,在除草剂发生作用前被分解。 (4)将目的基因导入受体细胞后,还需对转基因植物进行目的基因的检测与鉴定。 答案:(1)农杆菌转化 启动子 终止子 标记基因 (2)病毒外壳蛋白基因、病毒的复制酶基因、几丁质酶基因和抗毒素合成基因(写一种即可) (3)①不敏感 ②被分解 (4)目的基因的检测与鉴定 (3)要提高植物乙的耐旱性,需要利用农杆菌转化法将耐旱基因导入植物乙的体细胞中。要检测目的基因(耐旱基因)是否表达应该用抗原抗体杂交法检测目的基因(耐旱基因)的表达产物(即耐旱的相关蛋白质);个体水平检测可以通过田间试验,观察检测其耐旱情况。 (4)如果耐旱基因整合到同源染色体的一条上,则转基因植株的基因型可以用A_表示(A表示耐旱基因,_表示另一条染色体上没有相应的基因),A_自交后代基因型为AA∶A_∶_ _=1∶2∶1,所以耐旱∶不耐旱=3∶1,与题意相符;如果耐旱基因整合到同源染色体的两条上,则子代将全部表现耐旱,不会出现性状分离。 答案:(1)全部 部分 (2)筛选 (3)乙 表达产物 耐旱性 (4)同源染色体的一条上 2.(2018·赤峰模拟)2015年,屠呦呦因发现青蒿素治 疗疟疾的新疗法获得诺贝尔生理学或医学奖。工业上 青蒿素一般从青蒿植株中提取,产量低,价格高。基 因工程及细胞工程等为培育出高青蒿素含量的青蒿提 供了思路。科学家先通过紫外线处理大量青蒿幼苗 后,偶然发现一株高产植株。通过基因测序发现该高 产植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变。 (1)如果用青蒿某个时期mRNA反转录产生的双链cDNA进行PCR扩增,进行了30个循环后,理论上可以产生约为________个DNA分子,该双链与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群就叫青蒿的___________,获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列________(填“相同”或“不同”)。? (2)将获得的突变基因导入普通青蒿之前,先构建基因表达载体,图1、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答: 用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是________________________,构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子,启动子是________识别结合的位点。? (3)检测目的基因是否表达出相应蛋白质,应采取____ ____技术。目的基因导入组织细胞后,通过_________ ____技术培育出青蒿幼苗。? 【解析】(1)如果用青蒿某个时期mRNA反转录产生的双链cDNA片段进行PCR扩增,进行了30个循环后,由于PCR技术的原理是DNA的双链复制,理论上可以产生约为230个DNA分子,该双链与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群就叫青蒿的cDNA文库(或部分基因文库),获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列不同。 (2)由于SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因及外源DNA中的目的基因,用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时不能使用SmaⅠ切割,构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子,启动子是RNA聚合酶识别结合位点。 (3)检测目的基因是否表达出相应蛋白质,应采取抗原—抗体杂交技术。目的基因导入组织细胞后,通过植物组织培养技术培育出青蒿幼苗。 答案:(
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