血清钙Ca偶氮胂Ⅲ法测定.doc

血清钙Ca偶氮胂Ⅲ法测定 1. 实验原理 偶氮胂Ⅲ比色终点法。钙与偶氮胂Ⅲ在中性条件下形成蓝色复合物，显色强度与钙浓度成正比。加入8-羟基喹啉-5-磺酸掩蔽镁的干扰。 2. 标本采集 2.1 病人准备：无特殊要求。 2.2 类型：血清、肝素血浆或尿液。 3. 标本存放：血清/血浆稳定性：20～25℃保存可稳定7天；4～8℃保存可稳定3周；-20℃保存可稳定8个月。尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定4天；-20℃保存可稳定3个月；对24h尿液标本加浓盐酸10ml，并加热标本，使草酸钙溶解。 4. 标本运输：室温条件下运输 5. 标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。 6. 实验材料： 6.1 奥林巴斯钙测定试剂盒 试剂1 试剂2 6.1.1 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。 6.1.3 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。 6.1.4 注意事项：由于钙离子到处都有，必须严加注意采取避免污染。只使用一次性检测用品。微量螯合剂(如EDTA等)都会阻碍显色复合物的生成。须严加注意。试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。 6.2 校准品：使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件 6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件 7. 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪 8. 操作步骤 8.1 项目基本参数：参见AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件 8.2仪器操作步骤：参见AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件 9. 检验结果的判断与分析 10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。 11. 计算方法：以TruCal U复合校准品钙校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以mmol/L报告。 12. 参考值范围 血清/血浆： 2.15～2.57mmol/L 尿液： 女性： 6.24mmol/24h 男性： 7.49mmol/24h （注：各实验室应有自己的参考范围。）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。 13. 临床意义：钙测量用于诊断和治疗副甲状腺病，某些骨病，慢性肾病和手足抽搐（间歇性肌肉收缩或痉挛）等。尽管体内超过99%的钙存在于骨骼和牙齿，临床上最关心血液里的钙。骨骼作为一个储存器，通过释放钙防止低血钙和吸收钙防止血清钙水平过高，保持血清钙的相对稳定。饮食中钙的含量增加，吸收钙的百分比就减少，因此，吸收钙的数量能够保持相对稳定。在高钙饮食中钙吸收的轻微增加被反映在增加的肾排泄中。钙在许多细胞功能中起着重要作用，细胞内如肌肉收缩和糖原代谢，细胞外如骨钙化、凝血以及神经冲动传递。血浆钙有三种不同的形式：游离离子、和蛋白结合以及与阴离子（如磷酸根、柠檬酸根和碳酸氢根等）形成复合物。总钙水平的降低与多种疾病有关，如骨病（尤其是骨质疏松症），肾病（特别是透析患者），肠道吸收不良以及甲状腺功能减退。总钙水平升高为甲状旁腺机能亢进，转移性恶性肿瘤及肉瘤样恶性病变。在预防骨质疏松进行钙的补充时，钙的检测有助于临床监控。 14. 操作性能 14.1 线性范围：0.01～6.25mmol/L。 14.2 精密度：重复性的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU2700批内重复性小于3%，总不精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。 批内精密度 n=20 (mmol/L) s (mmol/L) CV (%) 批间精密度 n=20 (mmol/L) s (mmol/L) CV (%) 样品1 2.19 0.02 0.26 样品1 2.20 0.04 0.50 样品2 3.12 0.04 0.30 样品2 3.07 0.03 0.22 样品3 3.49 0.06 0.43 样品3 3.42 0.06 0.48 14.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对70个样品进行Ca检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.02x-0.005mmol/L；r=0.999。 14.4 灵敏度：本试剂的检测限为0.01mmol/L。 14.5 病人结果可报告范围 0.01～6.25mmol/L，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9％氯化钠溶液作1：