皮肤变态反应 局部淋巴结试验BrdU-ELISA.docxVIP

PAGE 7 附件5 皮肤变态反应：局部淋巴结试验:BrdU-ELISA Skin Sensitization: Local Lymph Node Assay: BrdU-ELISA（LLNA:BrdU-ELISA） 1 范围 本方法规定了小鼠局部淋巴结试验（LLNA:BrdU-ELISA）的基本原则和试验要求。 本方法适用于化妆品用化学原料皮肤变态反应的检测。 2 试验目的 确定重复接触化妆品用化学原料对哺乳动物皮肤局部是否可引起变态反应及其程度。 3 定义 3.1 皮肤变态反应（过敏性接触性皮炎）skin sensitization，allergic contact dermatitis 皮肤对一种物质产生的免疫源性皮肤反应。在人类这种反应可能以瘙痒、红斑、丘疹、水疱、融合水疱为特征。动物的反应不同，可能只见到皮肤红斑和水肿。 3.2 皮肤刺激性 dermal irritation 皮肤涂抹受试物后局部产生的原发可逆性炎性变化。 3.3 刺激指数 stimulation index 评价受试物皮肤致敏能力的值，是受试物组与溶剂对照组增殖率的比值。 4 试验原理 过敏原引起染毒部位回流淋巴结内淋巴细胞增殖，其增殖程度与过敏原的剂量和效力成比例。BrdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物，可代替胸腺嘧啶掺入增殖细胞新合成的DNA链中，其含量反映回流淋巴结内细胞增殖程度。用ELISA方法