皮肤变态反应 局部淋巴结试验DA.docxVIP

附件4 皮肤变态反应：局部淋巴结试验:DA Skin Sensitization: Local Lymph Node Assay: DA（LLNA:DA） 1 范围 本方法规定了局部淋巴结试验（LLNA:DA）的基本原则和试验要求。 本方法适用于化妆品用化学原料皮肤变态反应的检测。 2试验目的 确定重复接触化妆品用化学原料对哺乳动物皮肤局部是否可引起变态反应及其程度。 3 定义 3.1 皮肤变态反应（过敏性接触性皮炎）skin sensitization，allergic contact dermatitis 皮肤对一种物质产生的免疫源性皮肤反应。在人类这种反应可能以瘙痒、红斑、丘疹、水疱、融合水疱为特征。动物的反应不同，可能只见到皮肤红斑和水肿。 3.2 皮肤刺激性 dermal irritation 皮肤涂抹受试物后局部产生的原发可逆性炎性变化。 3.3 刺激指数 stimulation index 评价受试物皮肤致敏能力的值，是试验组与溶剂对照组增殖率的比值。 4 试验原理 过敏原引起染毒部位回流淋巴结内淋巴细胞增殖，其增殖程度与过敏原的剂量和效力成比例。通过生物发光法测定耳廓淋巴结内淋巴细胞ATP含量（与活细胞数相关）从而评价其增殖程度。生物发光法利用荧光素酶（luciferase）催化ATP和荧光素（luciferin）反应同时发光，其发光强度与ATP浓度线性相关。通过