果蔬单宁测定方法.pdf

单宁含量的测定 (1)试样的贮备 将果蔬样品取可食部分，用干净纱布擦去样本表面附着物，采用对角线分割法，取对角部分， 切碎，混匀，按四分法取样，于组织捣碎机中匀浆备用。 (2)单宁的提取 取2 g 果实加入20 mL 80% 甲醇，研磨成匀浆，3600 r/min 离心5min，取上清液，沉淀部分再 加入80% 甲醇洗涤，离心，取上清液，最后将两次得到的上清液定容至100 mL。 (3)标准曲线的绘制 吸取0.00 mg/L ，10.0 mg/L ，20.0 mg/L ，30.0 mg/L，40.0 mg/L ，50.0 mg/L 没食子酸标准溶液 各1.0 mL ，分别加入5.0 mL 蒸馏水，1.0 mL 钨酸钠-钼酸钠混合溶液和3.0 mL 碳酸钠溶液， 混匀，没食子酸标准溶液浓度分别为 0.0 mg/L，1.0 mg/L，2.0 mg/L ，3.0 mg/L ，4.0 mg/L ，5.0 mg/L ，显色，放置2 h ，以标准曲线0.0 mg/L 为空白。在765 nm 波长下测定标准溶液的吸光 度，以没食子酸浓度为纵坐标，吸光度值为横坐标，绘制标准曲线。 (4)样品的测定 吸取1.0 mL 试样提取液，分别加入5.0mL 蒸馏水，1.0 mL 钨酸钠-钼酸钠混合溶液和3.0 mL 碳酸钠溶液，混匀，显色，放置2h ，以标准曲线0.0 mg/L 为空白。在765 nm 波长下测定样品 溶液的吸光度，根据标准曲线求出试样溶液的单宁浓度，以没食子酸计。 (5)结果计算 试样中单宁（以没食子酸计）含量按式进行计算 单宁含量=C·10 ·A/m 式中：C ：为试样测定液中没食子酸的浓度（mg/L ）； A ：为样品稀释倍数；m ：为试样质量 （g ）；10：为试样测定液定容体积（mL ）。