第四讲RNA生物合成.ppt

③ II类内含子的剪切机制 细胞内定位：存在于真核生物的线粒体和叶绿体rRNA基因中 特点：转酯反应无需游离鸟苷酸或鸟苷。 过程： a. 由内含子本身的靠近3′端的腺苷酸2 ′-OH作为亲核基团攻击内含子5 ′端的磷酸二酯键，从上游切开RNA链后形成套索结构。 b. 再由上游外显子的自由3 ′－OH作为亲核基团攻击内含子3 ′位核苷酸上的磷酸二酯键，使内含子被完全切开。 c. 上下两个外显子通过磷酸二酯键相连。 ?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? Group II内含子切除体系 ④ 剪切位点突变导致地中海贫血症（thalassemia) 地中海贫血症起因于血红蛋白合成缺陷。 此类贫血症中有一类是异常剪接引起。 mRNA前体中的内含子（intron)必须精确的剪切掉，剪切位置发生一个核苷酸的差异，即会导致阅读框（reading frame)的改变，从而合成非功能蛋白。 β-珠蛋白的第一内含子发生突变，突变位点发生在正常3′剪接位点上游，离位点20个N处。 正常人是G，病人是A，即G A。从而导致产生了一个新的3′剪接位点（原位点上游），新剪切位点剪切，使mRNA中密码子变化。在新剪切点后的第7个密码子是蛋白质合成的终止密码。结果是合成不正常的血红蛋白β-亚基，导致贫血症。 贫血病人 5′CCTATTAGTCTATTTTCCACCCTTAGGCTGCTG 3′ 正常人 5′CCTATTGGTCTATTTTCCACCCTTAGGCTGCTG 3′ 内含子区 外显子 ⑥核酶发现的意义 生命的最初形式可能是RNA，其兼有DNA和蛋白质的功能。 在进化过程中 作为遗传模板的功能让位于DNA（RNA不稳定） 作为催化剂的功能让位于蛋白质。 c. 利用其机制，设计合成特异性切割病毒RNA或其它RNA的核酶，以便于治疗包括爱滋病、癌症在内的疾病。 ⑤ 核酶的类型： a.剪切型 b.剪接型 * lariat 套索 transesterification：转酯，交换 第四讲 RNA的生物合成 1.原核生物mRNA的特征 （1）原核生物mRNA的半衰期短。 （2）许多原核生物mRNA可能以多顺反子的形式存在。 后面几个顺反子的翻译起始会受到其上游顺反子结构的调控（图3-19） （3）原核生物mRNA的5′端无帽子结构，3 ′端没有或只有较短的polyA结构。 原核生物起始密码子AUG上游7-12个核苷酸处有一个被称为SD序列的保守区，因为该序列与16S rRNA 3′端反向互补，所以被认为在核糖体－mRNA的结合过程中起作用。 四、原核与真核mRNA特征比较 帽子结构有三种 0类帽子：m7GpppX，真核单细胞生物，如；酵母。 1类帽子： m7GpppXm , 真核普遍存在。 2类帽子： m7GpppXmpYm ，10 – 15%的真核有此结构。 形成：帽子结构在剪切前已形成。 2.真核生物mRNA特征 （1）5’ 端存在 帽子结构 （1）使mRNA免遭核酸酶的破坏。 （2）有帽子结构的mRNA更容易被蛋白质合成的起始因子所识别，从而促进蛋白质的合成。 作用： 图4 – 25 （2）绝大多数真核生物3′端具有多聚A尾巴形式 mRNApoly(A)+ 示有poly; mRNApoly(A)- 示无poly polyA是在polyA合成酶作用下逐个凑加的。 15-30bp AAUAAA + nATP mRNA polyA合成酶 PPi AAUAAA AAAAA AAAA AAUAAA为poly(A)附加的识别序列。 poly A的作用：（1）是mRNA由细胞核进入细胞质所必需的形式，它大大提高了mRNA在细胞质中的稳定性。 （2）可用于cDNA的合成。 RNA加工过程及其生理功能 加帽反应 mRNA从细胞核向细胞质转运，翻译起始 加工过程 推测的生理功能 加polyA反应 转录终止，翻译起始和mRNA降解 RNA的剪接 从mRNA, tRNA和rRNA分子中切除内含子 RNA的切割 从前体R