BMP9修饰的ADSCS复合携ICA的支架修复大段胡骨缺损的实验研究.docx

优秀毕业论文 精品参考文献资料 BMP． BMP．9修饰的ADSCS复合携ICA的支架 修复大段骨缺损的实验研究 缩略语表 缩略语 英文全称 中文全称 ADSCs adipose—derived stem cells 脂肪干细胞 BMPs bone morphogenetic proteins 骨形态发生蛋白 BMP．9 Bone morphogenetic protein一9 骨形态发生蛋白．9 ICA Icariin 淫羊藿苷 nHAC Nano-hydroxyapatite／collagen 纳米晶胶原基人工骨(细胞支架) BMSCs Bone marrow mesenchymal stemcells 骨髓问充质干细胞 DMEM dulbeeco’S modified eagle medium DMEM培养基 DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 FBS fetal bovine serum 胎牛血清 MTT 3-(4，5一dimethylthiazol-2一y1)一2，5一 噻唑蓝 diphenyltetrazolium bromide PBS phosphate buffered saline 磷酸缓冲盐溶液 万方数据 博士学位论文BMP 博士学位论文 BMP．9修饰的ADSCS复合携ICA的支架 修复大段骨缺损的实验研究 博士研究生：徐房添 指导教师： 尹庆水 摘要 研究背景骨缺损的有效解决办法一组织工程学在骨科领域，由于外伤、 骨肿瘤、骨坏死等原因，导致不同程度的骨缺损，在临床上非常常见，由于植 骨来源的限制，尤其是大段骨缺损，在治疗上仍然是一大难题。 组织工程学的发展为骨缺损的治疗提供了一个新的突破点。而寻找增殖和分 化能力强、来源充足的干细胞，具备较强地诱导并促进增殖和分化的成骨因子 以及最佳的新支架材料，达到最佳的骨缺损修复效果是骨科领域不断深入研究 的热点。骨的形成是由成骨干细胞、成骨的环境支架以及调节成骨的因子三个 要素共同作用的结果。获取稳定的、可诱导分化成骨细胞的成骨前体细胞(种 子细胞)至关重要。胚胎干细胞(embryonic stem cells，ESCs)系的建立为人类 探索干细胞生物学调控机理和评价其治疗许多疾病的潜能打开了方便之门，但 胚胎干细胞的研究面临许多社会伦理问题。目前研究较多的是骨髓来源的间充 质干细胞(bone iTlaITOW Mesenchymal Stem Cells，BMSCs)，曾被认为是骨组织 工程中最佳的细胞来源。然而，在临床应用过程中，自体骨髓干细胞治疗需要 从患者身上获得大量的细胞，这是一个侵害性的过程，且一次最多可抽取．至iJ40ml 的骨髓，约1．2x109个有核细胞，量偏少，使其应用受到了很大限制。 脂肪干细胞(adipose—derived stem ells，ADSCs) 近年来研究证实，在脂 肪组织中能分离和培养出脂肪问充质干细胞(ADSCs)，与MSCs类似，来源于 发育早期的中胚层和外胚层，可以向成软骨细胞、成骨细胞、神经细胞和脂肪 万方数据 摘要细胞等不同胚层来源的细胞分化，具备自我更新能力与多向分化潜能，兼有骨 摘要 细胞等不同胚层来源的细胞分化，具备自我更新能力与多向分化潜能，兼有骨 髓间充质干细胞等特性。局麻条件下，通过真空抽脂术，成人一次可获取200ml 的脂肪组织，获得约】×】06个ADSCs，约是40ml骨髓中BMSCs的40倍。ADSCs 由于取材容易，创伤小，含量高，增值能力好，无免疫排斥反应等优势，且可来 自自体细胞，不存在伦理学的争议，是一种较理想的组织工程种子细胞。有研 究表明，ADSCs体外条件下容易导入外源基因，可作为基因治疗的目的基因载 体。 骨形态发生蛋89(Bone morphogenetic protein-9，BMP-9骨形态发生蛋 白(BMPs)是转化生长因子beta超家族(Transforming growth factor．beta，TGF—D) 的成员之一，结构类似且高度保守，能够有效诱导体内和体外实验中成骨分化。 Kang等的研究证实：BMP9是体内外诱导MSCs成骨分化功能最强的成员之一， 其诱导成骨作用强于传统应用的BMP2、6、7，是一种重要的成骨细胞分化调节 因子。该研究结果为促进间充质干细胞成骨分化，构建具有基因强化成骨活性 的组织工程骨找到了有显著意义的突破点。 淫羊藿苷(Icariin，ICA)近年来，我国研究发现传统中药成分淫羊藿苷对 摘除卵巢所致大鼠骨质疏松症有良好的防治作用，而且能够促进体外培养的 BMSCs的增殖及成骨分化。且淫羊藿苷提取工艺简单，来源广泛，费用较低， 对促进骨缺损修复是一种很有应用前景的中药单体。近年来的研究成果肯定了 淫羊藿能够诱导