【创新大课堂】高考生物大一轮总复习 第二讲 细胞工程名师优质课件 新人教版选修3.pptVIP

据图回答下列问题。 (1)过程①所需的酶是 。 (2)过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体 的 存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。 (3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是 。原生质体经过  再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。 (4)若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株 和 植株的根尖，通过 、 、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。 (5)采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1－4进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1－4中一定是杂种植株的有 。 (6)对杂种植株进行 接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。 【解析】 (1)过程①表示原生质体的制备，要用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁 (2)用于融合的两个细胞，一个是黑芥苗的叶肉细胞，一个是花椰菜的根部细胞，其中供体细胞特有的结构是叶绿体，可通过观察叶绿体的有无作为初步筛选杂种细胞的标志。 (3)原生质体没有细胞壁的保护，需要加入适宜浓度的甘露醇以保证渗透压的稳定，以避免原生质体吸水或失水破坏原生质体的完整性；原生质体通过细胞壁杂交形成杂种细胞，进而形成愈伤组织。 (4)分析再生植株染色体变异类型，需要将再生植株细胞染色体和黑芥苗与花椰菜细胞中的染色体制片观察进行比较，制片的基本程序是解离、漂洗、染色、制片。 (5)根据图谱，花椰菜含有碱基对为300和600的DNA片段，黑芥还有碱基对为1000、1300和1500的片段，再生植株3，只含有长度为300和600的片段，与花椰菜一致，1、2、4既含有花椰菜DNA片段，又含有黑芥DNA片段，为杂种植株。 (6)对杂种植株接种黑腐病菌，能正常生长的即为具有高抗性的杂种植株。 【答案】 (1)纤维素酶和果胶酶 (2)叶绿体 (3)保持原生质体完整性 细胞壁 (4)双亲(或花椰菜和黑芥) 解离漂洗 (5)1、2、4 (6)黑腐病菌 考向二 动物细胞培养与体细胞核移植 运用动物体细胞杂交技术可实现基因定位。研究发现：用人体细胞与小鼠体细胞进行杂交得到的杂种细胞含有双方的染色体。杂种细胞在持续分裂过程中仅保留小鼠的染色体而人的染色体则逐渐丢失，最后只剩一条或几条染色体。如图是人的缺乏HGPRT酶的突变细胞株(HGPRT－)和小鼠的缺乏TK酶的细胞株(TK－)融合后在HAT培养液中培养的过程，结果表明，最终人的染色体在融合细胞中仅存有3号染色体或17号染色体或两者都有。已知只有同时具有HGPRT酶和TK酶的融合细胞才可在HAT培养液中长期存活与繁殖。 (1)体细胞杂交克服了 的障碍，过程①常用的生物方法是________________________________________________。 (2)过程②中，为了防止细菌的污染，所用培养液应该添加一定量的 ，此外，还要定期用 处理细胞，使贴壁生长的细胞脱落，形成细胞悬液。 (3)从培养过程看，HAT培养液不仅能提供养料，还起  作用。 (4)从图示结果看，可以确定人的 基因位于 号染色体上。 【解析】 将不同种生物的体细胞进行融合，可以打破生殖隔离，克服远缘杂交不亲和的障碍。动物体细胞融合过程中可以用灭活的病毒作促融剂。在动物细胞培养过程中，可以培养液中添加抗生素，防止细菌的污染。动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长，需用胰蛋白酶定期处理使细胞从瓶壁上脱落下来，制成细胞悬液，继续培养。由题干“只有同时具有HGPRT酶和TK酶的融合细胞才可在HAT培养液中长期存活与繁殖”可知HAT培养液是一种特殊的选择培养基。由图示结果可知，只要含有人的17号染色体的细胞就能够正常存活，说明人的TK酶基因位于17号染色体上。 【答案】 (1)远缘杂交不亲和(或生殖隔离) 用灭活的病毒诱导融合 (2)抗生素 胰蛋白酶 (3)选择(筛选) (4)TK酶 17 考向三 动物细胞融合和单克隆抗体 (2013·山东卷)科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS)，继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克