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第十章 细胞学检查;病理学 活体组织检验
细胞病理学 脱落细胞学检验
细针穿刺吸取细胞学检验;一、应用范围
(一)诊断某些良性病变 如宫颈涂片,诊断滴虫阴道炎;淋巴结穿刺诊断慢性淋巴结炎等。
(二)适用于阴道脱落细胞学检验 可判断女性雌激素水平,了解卵巢功能状态和确定卵巢排卵时间。
(三)用于肿瘤治疗后的随诊观察 判断肿瘤切除或放疗后的疗效以及有无复发和转移等。
(四)发现癌前病变 及时治疗癌前病变,干预癌变过??。
(五)用于诊断癌 适于防癌普查;二、细胞学检验的优点与不足
(一)优点
1.方法简单易学,容易掌握。
2.设备简单、容易推广,费用低。
3.安全,患者痛苦少或无痛苦,可反复取材检验,无不良反应
4.制片技术简捷,报告快速,出报告时间短。
5.癌细胞检出率较高,如技术条件好,采集细胞方法正确,某些肿瘤阳性率可达80%~90%。尤其对某些无明显临床表现的恶性肿瘤,如隐性肺癌,能够得到早期诊断。
6.可以对某些器官局部(如宫颈)进行多位点的脱落细胞学检查; (二)不足
1.取材不准,涂片过厚过薄,影响诊断结果
2.对黏膜表面的脱落细胞和体腔抽出液中的脱落细胞,难以分辨其微细结构。
3.标本采集的是散在细胞成分,不能全面观察病变组织的结构层次,因此不利于对肿瘤做组织学分型。;4. 无法确定肿瘤位置和深度
5. 脱落细胞易受人为因素影响。;三、注意事项;第二节 标本的采集和制片;一、标本采集
(一)标本采集原则
及时、正确、清洁、防止并发症;(二)标本采集方法
直接采集法
摩擦法
液体抽吸法
液体标本的采集
灌洗法;二、涂 片;(一)涂片操作注意事项
1.操作要轻巧,避免人为损伤脱落细胞。
2.厚薄要适宜。涂片太厚,细胞容易重叠,不利于镜检;涂片太薄,片中细胞数量太少,容易漏诊。
3.涂片应均匀。细胞成分应涂布在玻片的三分之二范围内,以利于观察和摄影,余1/3留作贴标签。
4.同一标本至少一次涂两张涂片,要做好标记,刻写编码,防止错号与漏诊的发生。; (二)涂片操作方法
1.推片法 通常把标本低度离心或自然沉淀后推片。方法是两手各持一张玻片,甲玻片前部涂有样品,然后将样品处与另一手上玻片之间形成40度左右夹角,将载玻片上的细胞标本匀速推动,做成细胞涂片。注意:因癌细胞体积较大,常位于细胞涂膜的尾部,因此推片时不要将尾部推出玻片外
2.涂抹法 为细胞学标本最常用的方法,常用棉签棒、针头或吸管将标本均匀涂抹于玻片上,应注意:涂片动作应轻柔利索,沿一个方向,一次涂抹而成。一般有往复涂抹法和转圈涂抹法。
3.拉片法 常把小滴状标本,置于两张载玻片之间,稍加压力反向拉开,即成两张厚薄均匀的涂片。选拉片法制片可适用于痰、胸腹腔积液和穿刺细胞标本。
4.喷射法 适用于液体标本。方法是在距离玻片2~3 cm的高度处,用配有细针头的注射器将标本均匀、反复地喷射在玻片上。此法适用于各种吸取液体标本的制作。
5.印片法 此法为活体组织检查的辅助方法。方法是将小块新鲜的病变组织在玻片的不同部位,印按3~4次后拿开 ;三、固定
固定(fixation)的主要目的在于保持细胞的自然形态,防止细胞自溶或细菌性腐败,保持细胞内蛋白质、糖等成分易于着色。
(一)常用固定液
1.95%乙醇固定液 为最常用的固定液,适合大规模防癌普查时使用,但渗透性较差。
2.乙醚乙醇固定液 此固定液渗透性强,固定效果好,适于一般细胞学染色,如巴氏染色和HE染色。
3.三氯甲烷乙醇固定液 又称卡诺(carnoy)固定液,穿透力强,固定效果好。由于试剂价格较贵,配置麻烦,一般只用于核酸染色、糖原染色和黏蛋白染色等特殊染色。
4.甲醇 固定效果好,结构清晰,常用于瑞氏、MGG或免疫组化染色的自然干燥涂片的预固定。; (二)固定方法
1.带湿固定法 即涂片尚未干燥时即进行固定的方法,适用于痰、宫颈刮片及食管拉网涂片的固定,不适用于太稀薄的标本
浸入法:可将涂片直接浸入容器的固定液中浸泡10~30 min多数标本用此法固定。
滴加法:或把涂片平放在染色架或桌面上,把固定液滴加在涂片上盖满涂片膜,此法可防止细胞脱落。常用于需做瑞氏或MGG染色的胸腹腔积液、尿及穿刺细胞涂片。
2.干燥固定法 待涂片自然干燥,再滴加或浸入固定液进行固定。;(三)注意事项
1.固定液要根据染色要求,选用合适的固定液 如巴氏或HE染色,应选用95%乙醇固定,进
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