课题3 分解纤维素的微生物的分离.pptVIP

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纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,植物每年产生的纤维素超过70亿吨;分布在植物的根、茎、叶中。 为什么地球上每年产生这么多的纤维素,我们还没有被纤维素淹没? 在枯树或草炭土中有许多能利用和分解纤维素来作为能源的微生物,今天我们就来分离土壤中能水解纤维素的微生物。 1、纤维素是一种由——首尾、相连而形成的——分子化合物,是含量最丰富的——物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中 是自然界中纤维素含量最高的天然产物。 2、纤维素酶是一种 酶,一般认为它至少包括三种组分,即 、 和 ,前两种酶使纤维素分解成 ,第三种酶将纤维二糖分解成 ---------- 葡萄糖 高 多糖 棉花 复合 CX酶 C1酶 葡萄糖苷酶 纤维二糖 葡萄糖 在一支试管中添加纤维素酶,另一支试管不添加纤维素酶;尽管醋酸-醋酸钠缓冲液用量不同,但都能维持相同的pH。 小实验是如何构成对照的? 纤维素酶活性的测定实验: 图2-12 纤维素水解滤纸试验,右边的试管中加入了纤维素酶,而左边的没有加入 (二)纤维素分解菌的筛选 1、筛选纤维素分解菌的方法是_____________。该方法可以通过________反应直接筛选。 刚果红染色法 颜色 2、其原理是:刚果红可以与纤维素形成____________,当纤维素被_________分解后,红色复合物无法形成,出现以_____________为中心的________,我们可以通过______________来筛选纤维素分解菌。 红色复合物 纤维素酶 纤维素分解菌 透明圈 是否产生透明圈 1.为什么要在富含纤维素的环境中找纤维素分解菌? 2.将滤纸埋在土壤中有什么作用? 根据生物与环境的互相依存关系,在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高,因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境。 人工设置微生物分解菌适宜的生存环境。 2、纤维素分解菌选择培养基属于______(固体、液体)培养基,原因是__________________。 液体 没有添加琼脂成分 3、该培养基对微生物______(具有,不具有)选择作用。如果具有,其选择机制是 ____________________________________________。 以纤维素粉为唯一碳源,能分解纤维素的微生物可以大量繁殖 具有 4、你能否设计一个对照实验,说明选择培养的作用? 1.选择培养的目的是什么? 下: 鉴别纤维素分解菌的培养基 CMC-Na 5-10g 酵母膏 1g KH2PO4 0.25g 琼脂 15g 土豆汁 100ml 将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000ml 方法一:先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应 方法二:在倒平板时就加入刚果红 思考:这两种方法各有哪些优点与不足 染色法 优点 缺点 方法一 方法二 颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用 操作繁琐,刚果红会使菌落之间发生混杂 操作简便,不存在菌落混杂问题 产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈,有些微生物能降解色素,形成明显的透明圈。 思考:这两种方法各有哪些优点与不足

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