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质量检定 青霉素是临床应用药物，使用对象是人，因 此要特别注意药品的质量。通过全面严格检验才 能出厂，检验的项目和标准一律按药典规定。 头孢图片，青霉素图片 * 结晶方法：纯化方法 【影响发酵生产因素】 4、温度的影响及控制 对菌丝生长和青霉素合成来说，最适温度是不一样的。 一般生长的适宜温度为27-30℃，而分泌青霉素的适宜 温度是在20℃左右。 生产上采用变温控制法，延缓菌丝衰老，增加培养液 中的DO，延长发酵周期，提高发酵得率。 【影响发酵生产因素】 5、溶氧的影响及控制 溶氧浓度是氧传递与氧消耗的动态平衡点。 溶氧 降到30％饱和度以下时，青霉素产量急剧下降； 低于10％饱和度时，则造成不可逆转的损失； 发酵液中溶氧浓度过高，说明菌丝生长不良或加糖率过低，使呼吸强度下降同样影响生产能力的发挥。 葡萄糖流加控制 【影响发酵生产因素】 6、补料的影响及控制 供给氮源 延长发酵周期 提高青霉素产量 补入表面活性剂 提高青霉素产量 加入少量高分子化合物 提高青霉素产量 液体搅拌速度梯度降低 避免打断菌丝、促进DO、除去CO2 分散菌丝 增加比表面积 增加氧和基质的传质 【影响发酵生产因素】 7、无机盐的影响及控制 S：降低时 产量降低3倍 P：降低时 产量降低1倍 Ca:Mg:K浓度比控制在30:20:41 铁离子对青霉素生物合成有显著影响，但对细胞具有毒害 作用，通常将Fe控制在30ug/mL以下。 Fe3+/(μg/ml) 相对发酵效价（%） Fe3+/(μg/ml) 相对发酵效价（%） 0（对照） 100 30 94.8 10 98.5 40 81.5 20 102.5 50 60.5 生产上按规定时间从发酵罐中取样，用显微镜 观察菌丝形态变化来控制发酵。生产上惯称“镜 检”，根据“镜检”中菌丝形态变化和代谢变化的其他 指标调节发酵温度，通过追加糖或补加前体等各种 措施来延长发酵时间，以获得最多青霉素。 【发酵液质量控制】 【发酵液质量控制】 生产上根据“镜检”判断，在自溶期即将来临之际，迅速停 止发酵，立刻放罐，将发酵液迅速送往提炼工段。 空泡扩大、增多及延伸 出现个别自溶细胞 菌丝 菌丝趋向衰老， 青霉素分泌停止 游离氨释放 进入自溶期 pH值上升 青霉素产量下降 色素、溶解和胶状杂质增多 发酵液变黏稠 增加下一步提纯时过滤的困难。 【发酵代谢中间调控】 1、pH NH2-N低，pH低时，加入？ NH2-N高，pH低时，加入？（若C下降，则补？） NH2-N高，pH高时，加入？ （若加？后，NH2-N和pH仍然不降低，则加？，促进菌体生长代谢） NH2-N低，pH高时，加入？ （NH4）2SO4 2NH4 + H2SO4 NaNO3 + 4H2 NH4 + 2H2O CH3COONa + 2O2 2CO2 + H2O + NaOH 【发酵代谢中间调控】 1、pH NH2-N低，pH低时，加入NH3·H2O NH2-N高，pH低时，加入CaCO3（若C下降，则补醋酸钠） NH2-N高，pH高时，加入糖，则NH2-N和pH都下降 （若加糖后，NH2-N和pH仍然不降低，则加P，促进菌体生长代谢） NH2-N低，pH高时，加入生理酸性物质，如（NH4）2SO4 （NH4）2SO4 2NH4 + H2SO4 NaNO3 + 4H2 NH4 + 2H2O CH3COONa + 2O2 2CO2 + H2O + NaOH 【发酵代谢中间调控】 2、DO浓度变化及其控制与判断 CL（溶氧）变化与前体、设备、工艺等因素有关。 A.正常CL要熟悉才能比较，一般是补料时， CL突然上升，然后又下降 到新的谷底。 B.异常CL可能原因： 染菌： CL可迅速下降借助镜检、无视可以判断 染噬菌体：CL上升，CC下降，发酵液迅速转稀 代谢异常：可能大量有机酸积累，CL不足导致 控制失灵：自动加油、通气。 【发酵代谢中间调控】 3、泡沫 前期（潜伏期），CL高，菌未生长，泡沫高。通气搅 拌，蛋白高等都是气泡产生的原因，属于正常现象，可 适当减少通气和搅拌。 潜伏期后，若泡沫仍居高不下，说明代谢异常，应加大 通气和搅拌，补加促进剂，提高温度，促进生长等措施。 4、补糖 若pH下降，糖耗快，引起C点低，说明代谢旺盛，DO不 够，应以提高CL为主，不可补C。若补C则随后pH更 低，直至发酵出现异常。 第四节 青霉素生物合成与理论产量 葡萄糖 NH3 产黄青霉 a-氨基己二酸 Cys Val 组合成三