大黄中游离蒽醌的提取与分离和鉴定.docxVIP

实验一 大黄中游离蔥酿的提取与分离和鉴定 实验编号：1 日期： 学时数：6学时 地点: 任课教师： 实验目的：掌握从大黄中提取和分离游离蔥醍的方法 实验原理:大黃中有多种游离恿醍及其昔类，总含量约2-5%o主要有大黄 酸、人黄素、人黄酚、芦荟人黄素、人黄素甲醸以及它们的葡萄糖背等。 从大黄中提取分离游离蔥醞时，先用20%硫酸加热使昔类水解，保留滤饼, 滤饼用乙瞇加热回流提取总蔥醍昔元(游离蔥醜)，提取液作TLC鉴识。 实验对象:大黄 主要仪器、试剂：电热套、烧杯、20%硫酸、薄层硅胶G、0. 5%CMC-Nao 实验操作步骤：酸水解：取大黄log ,粉碎，加20%硫酸水溶液100ml, 水浴上加热3-4小时，抽滤，滤饼水洗后自然干燥。 铺薄层硅胶G板：薄层硅胶G :0. 5%CMC-Na(l:3) 实验注意事项：①加热温度不要太高。 ②溶液保持微沸，防止药渣炭 化。③不断搅拌。 后记： 实验一大黄中游离蔥酿的提取与分离和鉴定 实验编号：2 日期： 学时数：6学时 地点: 任课教师： 实验目的：1?掌握从人黄中提取和分离游离蔥醍的方法。 掌握蔥醜类的色谱鉴别方法。 实验原理:大黄屮有多种游离蔥醞及其甘类，总含量约2-5%o主要有大黄 酸、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醸以及它们的葡萄糖昔等。 从大黄屮提取分离游离蔥醍时，先用20%硫酸加热使背类水解，保留滤饼, 滤饼用乙瞇加热回流提取总恵酿昔元(游离恵醍)，提取液作TLC鉴识。 实验对象:大黄滤饼 主要仪器、试剂：电热套、圆底烧瓶、冷凝管、乙瞇、硅胶薄层板、石油 瞇、乙酸乙酯 实验操作步骤：总轻基恵酿莒元的提取：取干燥滤饼，放入100ml圆底 烧瓶中，加入乙醞50ml,回流提取3 — 4小时，得乙瞇提取液。 乙瞇提取液经薄层层析检查有大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄 素甲瞇和人黄酚。薄层板为硅胶G-CMC-Na,展开剂为石油讎(60-90°C)— 乙酸乙酯(7 ： 3 ),直立展开。 实验注意事项：①加热回流时电热套电压小于50vo ②取石油醸(60-90°C) 7ml,乙酸乙酯3ml,混合均匀。。③控制点样量, 注意点样斑点位置。④仔细观察斑点、溶剂前沿移动距离。 后记:结论：在可见光下可看到4个斑点，Rf最大的黄色斑点为大黄酚和 大黄素甲醯的混合物，其余3个斑点依Rf由大到小分别为大黄素（橙色 斑点），芦荟人黄素（黄色斑点），人黄酸（黄色斑点 [ 实 训 目 的 ] 1 、能 够 运用回流提 取 法对 大 黄中 总 蔥酿类 化合物进彳 亍提取 2 、能 够 熟练运用pH 梯 度萃 取 法对 大 黄中游 离葱酿进行 分离. 3 、 正 确 判 断 显 色 反 应 、 薄层 色谱 的 结果 [ 实 训 原 理 ] 人黄中含冇大黄索型游离恵醍及其昔类,木实训利用人黄中的恵醍类化介物均可溶于乙醇而提取，根 据游离恵醜及恿:酿昔在水和乙陋屮溶解度的不同采用萃取方法分离.游离恿酿的分离是利用各疑棊恿醍 类化合物酸性不同，采用 pH 梯度萃収法进行. 【实 训 材 料】 圆底烧瓶、冷凝管、研钵、水浴锅、分液漏斗、烧杯、三角瓶、表面皿、试管、层析缸、pH试纸薄 层硅胶、CMC-Na、人黄粗粉、95%乙醉、乙醴、盐酸、三氯甲烷、5%K0H、5%Na2C03 5%NaHC03 0. 5%NaOH 新华色谱滤纸（20cmX 7cm）.苯-醋酸乙酯（8： 2）、苯-甲醇（8 ： 1）、甲苯、氨0. 5%酷酸镁、1%大黄酸三氯 甲烷溶液、1%大黄素三氯甲烷溶液、1%芦荟大黄素三氯甲烷溶液 TOC \o 1-5 \h \z 【实 训 步 骤】 乙 醇 总 提 取 物 的 制 备 游离恿酿的提取収大黄粗粉50g,置于500ml圆底烧瓶中，加95%乙醇以约高岀生药血为度，置水浴加 热回流2~3小时，趁热抽滤.滤渣再以95%乙醇热捉二次，趁热抽滤后合并三次乙醇提取液.浓缩乙醇捉取 液 ， 得 到 乙 醇 总 提 取 物. 、 总游离恵酿的提取，亲脂性成分与亲水性成分分离 将乙醇总提取物浸膏加水适量混悬，加乙陋150ml于500ml分液漏斗屮翠取，充分振荡后放置，倾出讎 层，再加50ml乙醯振摇，放置，倾出艇层，同法操作6次,直至乙醴液呈色较浅时为止，合并乙瞇液，乙醴溶 将含有游离蔥服的乙瞇溶液移至250ml的分液漏斗屮，加5%NaHCO3水溶液20ml,振摇.放置分层，放出 卜?层NaHC03溶液，置于另一三角瓶中，上层乙瞇溶液留存于分液漏斗中，再加5%NaHC03溶液15ml萃取- 乙储挥发，可酌量补加?合并NaHC03提取液，注意其呈色，在搅拌下小心滴加盐酸调pH2~3,观察酸化过程中 的呈色变化，析出物抽滤收集，T?燥后称重. ② 大 黄 素 的 分 离 留存在分液漏斗屮的乙瞇液，用5%Na2