毛囊外根鞘细胞的分离培养及鉴定.docVIP

PAGE PAGE 1 毛囊外根鞘细胞的分离培养及鉴定 　　[摘要]目的建立毛囊隆突处外根鞘细胞的分离和培养方法。方法利用中性蛋白酶分离得到单个毛囊，采用胰酶消化法进行细胞培养，倒置6显微镜观察细胞形态，绘制细胞生长增殖曲线，免疫荧光检测干细胞相对特异性标识分子角蛋白19（K19）和β1整合素表达情况，分别用分离培养的角质形成细胞（Keratinocytes，KCs）做对照。结果免疫荧光检测显示90%左右的毛囊外根鞘细胞胞浆中均有K19和β1整合素的阳性表达。结论应用中性蛋白酶和胰酶消化法体外培养毛囊隆突处外根鞘细胞简单、可行。 　　[关键词]毛囊；外根鞘细胞；毛囊干细胞；角质形成细胞；分离；培养 　　[中图分类号]R392.2[文献标识码]A[文章编号]1673-9701（2013）06-0001-03 　　毛囊的上皮由表皮延伸而来，主要分为外根鞘（outerrootsheath，ORS）和内根鞘（innerrootsheath，IRS），外根鞘相当于表皮的基底层和棘细胞层。皮脂腺下部的外根鞘通常称为隆突部[1]，该隆突部位目前被认为是毛囊干细胞（hairfolliclestemcell，FSC）存在的主要部位[2]。Hong等[3]将人FSC在黑色素细胞分化培养基中培养14d，其中有20%～40%的细胞出现了黑色素细胞特有的树枝状形态等特点。因此分离毛囊隆突部的ORS细