洋葱苯丙氨酸解氨酶基因AcPAL2的克隆与表达分析.pdfVIP

园艺学报，2015 ，42 (3) ：505 –512. Acta Horticulturae Sinica doi ：10.16420/j.issn.0513-353x.2014-0900；http ：//www. ahs. ac. cn 505 洋葱苯丙氨酸解氨酶基因 AcPAL2 的克隆与表 达分析 1 2 1,* 1 梁 毅 ，刘小义 ，张洪伟 ，谭武平 1 （北京市农林科学院蔬菜研究中心，农业部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室，北京京研益农科技发 2 展中心，北京 100097； 中国质量认证中心，北京 100070） 摘 要：利用简并 PCR 技术和 RACE 技术克隆得到了一条洋葱的苯丙氨酸解氨酶（PAL ）基因全长 cDNA 序列。该 cDNA 序列全长 2 349 bp ，编码长 685 个氨基酸残基的多肽序列，命名为AcPAL2 。Blast 分析表明该序列与虎眼万年青 Galtonia saundersiae、野蕉 Musa balbisiana 的相似性均较高。Real-time PCR 表达及花青素含量分析表明，红皮洋葱该基因表达量最大，而黄皮和白皮洋葱表达量极低；在红皮洋葱中 该基因在膨大初期大量表达，并迅速降低至一定程度后趋于相对平稳表达，且与花青素的积累过程相一致。 关键词：洋葱；花青素；AcPAL2 ；基因表达 中图分类号：S 633.2 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2015 ）03-0505-08 Molecular Cloning and Expression Analysis of AcPAL2 in Onion 1 2 1,* 1 LIANG Yi ，LIU Xiao-yi ，ZHANG Hong-wei ，and TAN Wu-ping 1 （Beijing Vegetable Research Center of Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences ，Key Laboratory of Biology and Genetic Improvement of Horticultural Crops in North China ，Beijing Jing Yan Yi Nong Sci-Tech Development Center ， 2 Beijing 100097 ，China； China Quality Certification Center，Beijing 100070，China ） Abstract ：A full-length cDNA of phenylalanine ammonia lyase-homologue （AcPAL2 ）was isolated from onion using degenerate PCR and the RACE （rapid amplification of cDNA ends ）method. The full-length cDNA is 2 349 bp long，which encodes a polypeptide of 685 amino acids. Blast analysis indicate that the polypeptide shares a relatively high similarity with Galtonia saundersiae and Musa balbisiana. Rea