血清CK及其同工酶测定检验系生化教学案例.pptVIP

血清CK及其同工酶测定检验系生化 一、概述 肌酸激酶（Creatine kinase，CK，EC2.7.3.2）全称腺苷三磷酸：肌酸N-磷酸转移酶，催化肌酸（Cr）和ATP或磷酸肌酸（CrP）和ADP之间磷酸转移的可逆反应。 肌酸+ATP 磷酸肌酸+ADP+H+ CK 偏碱pH有利于顺向反应进行，中性pH倾向逆向反应，一般逆向反应较顺向反应快2~6倍； Mg2+是CK 的必需激活剂，但过量反而抑制； 样品宜用血清或肝素化血浆； 标本应避免严重溶血； 血清中CK较不稳定，室温4h或4℃12h可使酶失活。 二、CK测定方法 比色法 紫外分光光度法 荧光法 2、酶偶联-丙酮酸测定法 肌酸+ATP 磷酸肌酸+ADP ADP+磷酸烯醇式丙酮酸 丙酮酸+ATP 丙酮酸+2，4-二硝基苯肼 丙酮酸-2，4-二硝 基苯腙 CK 丙酮酸激酶 ☆顺向反应测定CK的底物较便宜；☆测磷法的试剂较易得而稳定；☆丙酮酸激酶价格较贵，不易获得；☆顺向反应速度较慢，灵敏度较低。 利用逆向