血清谷丙转氨酶alt的测定知识课件.pptVIP

血清谷—丙转氨酶活性的测定（改良赖氏法）;【目的要求】 1.掌握血清谷丙转氨酶活性测定的基本原理。 2.熟悉血清谷丙转氨酶活性测定的具体操作方法。 3.了解血清谷丙转氨酶活性测定的临床意义。;;生成的丙酮酸可与起终止和显色作用的2,4二硝基苯肼发生加成反应，生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙，进而在碱性环境中生成红棕色的苯腙硝醌化合物，其颜色的深浅在一定范围内与丙酮酸的生成量，亦即与ALT活性的高低成正比关系。据此与同样处理的丙酮酸标准液相比较，便可算出或通过标准曲线查出血清中ALT的活??。;取干净试管12支，按下表所示标号，要求各S管和U管进行双管平行操作。先做对照管和测定管，在30min保温期间再做空白管和标准管。 ;【实验结果】 1.赖氏法测定ALT的标准曲线(即计量反应曲线) 在坐标纸上以上表中An－A 0之值为纵坐标，相应的酶活性的卡门氏单位为横坐标作图，即得赖氏法测定ALT的标准曲线 2.标本中ALT活性结果 ⑴查标准曲线 利用测定所得的吸光度结果(AU－AB)，便可从标准曲线上查得标本的ALT结果 ⑵计算 将实验测得的AU－AB 、AS 代入下面计算公式，即可算得标本中ALT活性 ? ;【方法评价 】 ALT活性测定主要有两类。一是卡门氏（Karman）分光光度法，测定的是酶促反应速率。其原理如下： 由于NADH在波长340nm处有特异吸收峰，因此ALT的活性