分子生物学第7章.pptVIP

终止子结构 5’pppG 5? 3? 3?5? 茎环结构使转录终止： 1、使RNA聚合酶变构 2、使转录复合物趋于解离， RNA产物释放 RNA-pol 5? 3? DNA 原核生物转录过程中的现象 核糖体 RNA RNA聚合酶 转录翻译降解 7.4 真核生物的RNA聚合酶及其转录 与原核基因的转录相比较，真核基因的转录具有以下特殊性： 转录单元为单顺反子 RNA聚合酶高度分工 多种蛋白质因子参与（TF） 顺式作用元件复杂 转录水平的调控以正调控为主 真核生物的RNA聚合酶 种类 Ⅰ Ⅱ Ⅲ 对鹅膏蕈碱 的反应 45S-rRNA hnRNA 5S-rRNA tRNA、snRNA 耐受 极敏感 中度敏感 转录产物 真核基因转录的过程比原核基因的转录更复杂，涉及更多的酶和蛋白质因子。真核细胞的核内RNA聚合酶有3种类型，并有更多的序列元件和蛋白质因子参与转录。 * 第7章 RNA的转录合成 7.1 RNA转录概述 在DNA指导下的RNA合成称为转录(transcription)。 转录过程：在RNA聚合酶的催化下，以DNA的一条链作为模板合成RNA分子，合成以碱基配对的方式进行，产生的RNA链与DNA模板链互补。 转录产物：各类RNA分子，如mRNA、rRNA和tRNA，以及具有各种特殊功能的小分子RNA。 最初转录的RNA产物通常都需经过一系列加工和修饰才能成为成熟的RNA分子。 RNA所携带的遗传信息主要用于指导蛋白质的合成（翻译），也可用于指导RNA或DNA的合成（RNA复制和逆转录）。 3种RNA的转录 7.1.1 RNA转录的一般特点 转录具有选择性 只对基因组或DNA分子中的编码区进行转录，特定时空下选择特定的基因进行转录。 RNA链的转录具有特定起始位点与终止位点，此转录区域称为转录单位。 催化转录反应的酶是RNA聚合酶（RNA polymerase)。 被转录的DNA双链中只有其中一条模板链（反义链）作为RNA合成的模板。 转录的起始由DNA分子上的启动子（promoter）控制。 合成RNA的底物是4种5-核糖核苷三磷酸：5-ATP、5-GTP、5-CTP、5-UTP。 新合成的RNA链总是以5-3方向进行延伸。 在体外，RNA聚合酶能使DNA的两条链同时进行转录；但在体内DNA只有一条链可用于转录，用于转录的链称为模板链，或负链（-链），又称反义链；对应的链则为非模板链，即正链（+链），又称有义链、编码链。 转录时无需将DNA双链完全解开，而是局部解链，以其中一条链为有效模板合成。DNA经转录后仍以全保留的方式保持双螺旋结构，而已合成的RNA链则脱离DNA链。 DNA转录RNA 7.1.2 原核生物和真核生物基因转录的差异 真核生物与原核生物转录有一定的相似性，但也存在着以下几点差异： 原核生物只有一种RNA聚合酶；而真核生物有3种以上的RNA聚合酶。 原核生物的初始转录产物大多数都是编码序列，与蛋白质的氨基酸序列成线性关系；而真核生物的初始产物含有内含子序列。 原核生物的转录产物直接行使翻译模板的功能；而真核生物的转录产物须历经剪接、修饰的转录后加工成熟过程。 原核生物的转录产物mRNA为多顺反子，大多数真核生物的mRNA是单顺反子结构。 原核生物的RNA转录与蛋白质翻译相互偶联，可同时进行。 7.1.3 RNA的转录主要有4个阶段 RNA聚合酶识别启动子 转录起始 转录延伸 转录终止 转录泡 催化位点 7.2 RNA聚合酶对启动子的识别与结合 启动子及其结构与功能 启动子(promoter)是RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列，它含有RNA聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列位点。 启动子本身不被转录。 细菌的启动子是待转录DNA分子中的一段特定的核苷酸序列，一般位于转录基因的上游。 原核生物基因的启动子分为两类：①核心启动子；②启动子上游部位。 启动子是基因转录起始所必需的一段DNA序列，是基因表达调控的上游顺式作用元件之一。细菌启动子一般含有转录起始点、-10序列、-35序列以及在-10与-35序列之前较严格的距离。 启动子的研究： (RNA聚合酶保护法) 5? 5? RNA聚合酶保护区 结构基因 保守序列 （一致性序列） 开始转录 T T G A C A A A C T G T -35 区 (Pribnow box) T A T A A T Pu A T A T T A Py -10 区 1 -30 -5 0 10 -10 -40 -20 5 ? 3 ? 3 ?