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- 2019-11-27 发布于湖北
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双歧杆菌 片 球 菌 ﹙1﹚检样处理 以无菌操作取经过充分摇匀的检样25ML,放入含有225ML灭菌广口瓶内做成1:10的均匀稀释液。 ﹙2﹚样品稀释 用1ML灭菌吸管吸出取1:10稀释液1ML,沿管壁徐徐注入含有9ML灭菌生理盐水的试管内,作成1:100稀释液,另取一毫升灭菌吸管,按上述操作顺序,做10倍递增稀释液,如此每递增一次,即换用1支一毫升灭菌吸管。 ﹙3﹚选择适宜稀释样液 选择2~3个以上适宜稀释度,分别在作10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移一毫升稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。 ﹙4﹚制检样倾注平板 稀释液移入平皿后,应及时将冷至50℃的乳酸菌计数培养基注入平皿约15ML,并转动平皿使混合均匀后,静置,冷却成平板。 ﹙5﹚制作空白对照平板 将乳酸菌计数培养基倾入加有一毫升灭菌生理盐水的灭菌平皿内作空白对照。 过氧化氢酶试验 ﹙1﹚试剂 3%过氧化氢酶 ﹙2﹚试验方法 取固体培养基上菌落一环,置于洁净试管内,滴加3%过氧化氢酶溶液2毫升,观察结果。 30S内发生气泡为阴性,不产生气泡者为阳性。 * * * * * * * * * * * * * * 一.乳酸菌是指:一群能分解葡萄糖或乳糖产生乳酸,需氧和兼性厌氧,多数无动力,过氧化氢霉阴性,革兰氏阳性的无芽孢杆菌和球菌。 乳酸发酵有两个类型:发酵产物中只有乳酸的,称为同型乳酸发酵,如乳酸链球菌,乳酪链球菌,干酪乳杆菌等;发酵产物中除乳酸之外有乙酸,乙醇,CO2和H2的,称为异型乳酸发酵,如一些明串珠菌,乳酸杆菌等。 1.乳杆菌属 (1)形态特征 细胞形态多样,长或细长杆状,链状排列。革兰氏阳性,有些菌株革兰氏染色呈两极体,内部有颗粒物或呈条纹。通常不运动,有些具有周身鞭毛。无芽孢。无细菌色素,大多不产色素。 (2)生化特征 培养需多种氨基酸,维生素,肽,核酸衍生物。微好氧性,厌氧培养生长良好。最适温度30~40OC,耐酸性强。发酵糖类有三种方式:同型发酵,兼异型发酵,异性发酵。 乳酸菌 双歧杆属菌 2.(1)形态特征 细胞形态多样,Y字型,V字型,弯曲状,勺型,典型形态为分叉杆菌。革兰氏阳性,亚甲基蓝染色菌体着色不规则。无芽孢和鞭毛,不运动。 (2)生化特性 营养要求苛刻,培养许多种双歧因子。专性厌氧。温度范围25~45。C可生长,最适温度37。C。不耐酸,PH大于等于5.5对菌体存活不利。能利用葡萄糖,果糖,乳糖和半乳糖,蛋白质分解能力微弱,能利用铵盐作为氮源,不还原硝酸盐,不水解精氨酸,不液化明胶,不产生吲哚,联苯胺反应阴性,接触酶反应阴性。 3.链球菌属 (1)形态特征 细胞呈球形或软圆形,成对或成链排列,革兰氏阳性,无芽孢,一般不运动,不产生色素。但肠球菌群中某些种能运动或产色素。 (2)生化特征 兼性厌氧,厌氧培养生长良好,同型乳酸发酵,接触酶反应阴性。依化生态性可将链球菌属分为4个种群。(看书195页的,表7-1) 4.明串珠菌属
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