低氧对心脏成纤维细胞增殖细胞核抗原表达与表型.pdf

中国病理生理杂志 　Chinese Journal of Pathophysiology 　2003 ,19 ( 10) :1311 - 1315 ·13 11 · ( ) [文章编号] 　1000 - 4718 2003 10 - 1311 - 05 低氧对心脏成纤维细胞增殖细胞核 抗原表达与表型的影响 1 1 , △ 1 2 1 3 1 于 　军 , 　朱妙章 , 　裴建明 , 　陈宝莹 , 　吕顺艳 , 　董明清 , 　魏启明 (第四军医大学 1生理学教研室 , 2 唐都医院放射科 , 3病理生理学教研室 ,陕西 西安 710032) ( ) ( ) 　　[摘 　要] 　目的:观察不同程度低氧对乳鼠心脏成纤维细胞 CFs 增殖细胞核抗原 PCNA 表达与表型的影响 。 ( ) 方法 :分离 、纯化 、培养乳鼠CFs ,随机分为 3 组 :对照组 、中度低氧组和重度低氧组 , 以四唑盐 MTT 比色法检测细胞 的增殖情况 ,采用免疫组织化学的方法检测 PCNA 的表达情况 , 电镜观察细胞的超微结构 ,并采用激光共聚焦显微镜 α ( ) ( 检测各组细胞内 - actin 的表达情况 。结果 : 中度低氧组 MTT 的 490 nm 吸光度值 A 490 nm 较对照组增加 184 ± ) ( ) ( ) ( ) 250 % P 005 ,而重度低氧组 A 490 nm 值较对照组降低 158 ±250 % P 005 。免疫组化结果显示 :对照组 ( ) CFs 的 PCNA 有一定的基础表达 ,核内阳性反应颗粒较少 ,染色强度为 922 ±91 % AU ,中度低氧组 CFs 的 PCNA 染 ( ) ( ) 色强阳性 ,可见密集的阳性反应颗粒 ,染色强度为 1280 ±114 % AU P 005 vs 对照组 ,重度低氧组 CFs 核内无 ( ) 明显的阳性反应颗粒 ,染色强度为 899 ±84 %AU 。透射电镜下 ,正常组 CFs 呈梭形 ,胞浆内有丰富的粗面内质网 和高尔基复合体 ,线粒体和微丝的含量较少 ,无基膜存在 ,呈典型的成纤维细胞表型 。中度低氧刺激 72 h ,CFs 粗面 内质网明显减少 ,胞浆内出现大量的微丝 , 以质膜下分布最多 ,呈现肌成纤维细胞表型 。重度低氧组 CFs 内仅有少量 α 的微丝 。激光共聚焦显微镜显示