反义核酸药物进展.docVIP

科技信息○科教前沿○ＳＣＩＥＮＣＥ＆ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹＩＮＦＯＲＭＡＴＩＯＮ２００８年第１２期 反义核酸药物进展 吴东 （中华人民共和国科学技术部中国科学技术交流中心中国北京１０００４５） 摘要】反义核酸药物是基因药理学的一个新领域，对于肿瘤、遗传病以及传染病的防治具有重要意义。本文综述了近年来国内外反义核【 酸药物的研究开发、临床试验以及市场前景等。 关键词】反义核酸药物；进展【 ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＡｎｔｉｓｅｎｓｅＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄＤｒｕｇ ＷＵ，Ｄｏｎｇ （ＣｈｉｎａＳｃｉｅｎｃｅ＆ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＥｘｃｈａｎｇｅＣｅｎｔｅｒ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＰＲＣ，Ｂｅｉｊｉｎｇ，１０００４５） 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ａｓａｎｅｗｔｅｒｒｉｔｏｒｙｏｆｇｅｎｅｔｉｃｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，ａｎｔｉｓｅｎｓｅｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｄｒｕｇｈａｓｂｅｅｎｐｒｏｍｏｔｉｎｇｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｔｕｍｏｒｒｅｓｅａｒｃｈａｓｗｅｌｌａｓｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｇｅｎｅｔｉｃａｎｄｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｄｉｓｅａｓｅｓ．ＴｈｅｆｏｌｌｏｗｉｎｇａｒｔｉｃｌｅｒｅｖｉｅｗｓｔｈｅｄｏｍｅｓｔｉｃａｎｄｏｖｅｒｓｅａｓＲ＆Ｄ，ｃｌｉｎｉｃａｌｔｅｓｔｓａｎｄｍａｒｋｅｔｉｎｇｏｆａｎｔｉｓｅｎｓｅｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｄｒｕｇ． 【ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ａｎｔｉｓｅｎｓｅｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｄｒｕｇ； ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ０．前言 反义技术（ＡｎｔｉｓｅｎｓｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）是根据碱基互补原理，用人工合 成或生物体合成的特定ＤＮＡ或ＲＮＡ片段抑制或封闭基因表达的技 术，是一种新的药物开发方法。利用反义技术研制的药物成为反义核 酸药物（简称反义药物），包括反义ＤＮＡ（ＡｎｔｉｓｅｎｓｅＤｅｏｘｙｒｉｂｏｎｕｃｌｅｉｃ 反义ＲＮＡ（ＡｎｔｉｓｅｎｓｅＲｉｂｏｎｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄ）和核糖酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ），通Ａｃｉｄ）、 常指反义脱氧寡核苷酸（ＡｎｔｉｓｅｎｓｅＯｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ，ＡＳＯＤＮ）。根 据核酸杂交原理，反义药物能与特定基因杂交，在基因水平干扰致病 蛋白的产生过程。蛋白质是生物体结构和功能的主要物质，在人体代 谢中扮演非常重要的角色，几乎所有的人类疾病都是由蛋白质的异常 引起的，无论是宿主疾病（肿瘤等）还是感染疾病（肝炎等）。传统药物 主要是直接作用于致病蛋白本身，反义药物则作用于编码致病蛋白的 基因，因此可以应用于多种疾病的治疗。用最广泛的是硫代寡核苷酸（ＰＳ－ＡＳＯＤＮ，图２），它具有良好的水溶性、稳定性及易于大量合成，基本上能满足临床治疗的需要［２，３］。 一、反义药物特性及其作用的分子机理 Ｚａｍｅｃｎｉｋ和Ｓｔｅｐｈｅｎｓｏｎ最早在实验室里合成了一种长度为１３个 脱氧核苷酸序列的反义寡核苷酸以抑制罗氏（Ｒｏｕｓ）肉瘤病毒ｍＲＮＡ 的表达取得成功，这证明了反义药物治疗疾病的可行性。随着反义 技术的日趋成熟，许多反义药物已经走出实验室进入临床试验和市 场［１］。 （一）反义药物的作用机制 如图１所示，根据Ｃｒｉｃｋ的中心法则，正常情况下，在细胞核中 ＲＮＡ多聚酶以ＤＮＡ的有义链为模板转录成ｍＲＮＡ，ｍＲＮＡ通过核孔 进入细胞质与核糖体结合形成复合物，载有氨基酸（ＡＡ）的ｔＲＮＡ以自 身的反密码子与ｍＲＮＡ上的密码子配对，前一个ｔＲＮＡ上ＡＡ的羧基 和相临后一个ｔＲＮＡ上ＡＡ的氨基发生脱水反应形成酰胺键，随着肽 链的延长最后形成Ｎ→Ｃ的蛋白质分子。在用反义药物处理的情况 下，当ｍＲＮＡ进入细胞质后，特定ＡＳＯＤＮ分子与ｍＲＮＡ上的特异位 点杂交形成ＤＮＡ－ＲＮＡ复合物，抑制ｍＲＮＡ与核糖体的结合，同时激 活ＲＮａｓｅ－Ｈ降解ｍＲＮＡ，从而没有蛋白质产物的产生。 鉴于ＡＳＯＤＮ与ｍＲＮＡ存在非特异性的结合，ＡＳＯＤＮ分子需要达 到一定的长度，通常在１５至２０个脱氧核苷酸。实验证明短到７个核 苷酸的ＡＳＯＤＮ分子就可以激活由ＲＮａｓｅ－Ｈ介导的靶ｍＲＮＡ降解作 用。 （二）用途 反义药物的分子基础及其作用机制决定了它在治疗上的专一性、 高效性和低毒性的特点，可广泛用于以下多种疾病的治疗： １．抗肿瘤； ２．治疗心血管系统疾病； ３．抗感染； ４．病毒性或其它传染病的治疗。 （三）存在的问题及解决方案 １．由于体内广泛存在的核酸酶（ＤＮａｓｅ、ＲＮａｓｅ），天然寡核苷酸极易 寡核被降解，故实验中多采用修饰的寡核苷酸，以增强其核酸酶抗性。 苷酸的修饰方法有多种，如硫代、磷酸三酯、甲基磷酸化、α－寡核苷酸、 连接及肽核酸等，其中研究最深入、应二硫代磷酸酯、２’－修饰、２’－５’图１ＡＳＯＤＮ作用机制图２天然寡核苷酸和硫代寡核苷酸结构示