邻二氮菲吸光光度法测定微量铁.pptVIP

邻二氮菲吸光光度法测定微量铁 一、实验目的 了解分光光度计的结构和正确的使用方法 学习如何选择吸光光度法分析的实验条件 学习吸收曲线、工作曲线的绘制及最大吸收波长的选择 二、实验原理 吸光光度法是根据物质对光选择性吸收而进行分析的方法。 吸光光度法具有较高的灵敏度和一定的准确度，特别适合于微量组分的测量。 I0 ----某一波长的单色光 S ----某一吸光物质溶液 It ---- 透过光 T ---- 透光率（透射比） A ----吸光度 朗伯-比尔定律 A=Kdc 当液层厚度d以cm，吸光物质浓度c以mol/L为单位时，系数K就以ε表示，称为摩尔吸光系数。朗伯-比尔定律表示为： A=εdc 分光光度计的结构 仪器结构-正视图 仪表盘 721W型分光光度计的使用方法 1.预热 打开仪器电源开关，预热30分钟。 注意：预热时，样品室盖应打开。 2.比色皿的使用 从蒸馏水中取出比色皿，擦干。注意拿比色皿的时候拿毛玻璃面。 向比色皿内注入少量试液，润洗三次，然后注入3/4至4/5的试液，用滤纸片擦干外壁所挂水珠。 注意光面对光源。 3.吸光度测量 在试样槽中放置参比溶液与样品，参比溶液应放在第一个试样槽中。 转动波长手轮，使显示窗显示所需波长。 使参比溶液位于光路中，打开样品室盖，按TAC键使T指示灯亮，仪器自动调节T为0%；关上样品室盖，仪器自动调节T为100%。 拉动拉杆，使样品进入光路，按TAC键使A指示灯亮，待仪器稳定后从显示屏上读取吸光度值。 邻二氮菲是测定微量铁的较好试剂。在pH=2-9的溶液中，试剂与Fe2+生成稳定的红色络合物，其lgK稳=21.3，摩尔吸光系数ε=1.1*104，红色络合物的最大吸收峰在510nm波长处。 三、实验步骤 1.条件实验 a.吸收曲线的制作和测量波长的选择 用1cm比色皿，以试剂空白为参比溶液，在440~560nm之间，每隔10nm测一次铁标准溶液的吸光度，在最大吸收峰附近，每隔5nm测一次吸光度。 b.显色剂用量的选择 2.工作曲线的制作 在6个50mL容量瓶中，用吸量管分别加入0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0mL铁标准溶液，分别加入1mL盐酸羟胺，2mLPhen，5mL醋酸钠溶液，摇匀，定容。10min后测量其吸光度。 3.含铁水样的测定 四、数据处理 1.吸收曲线 以A为纵坐标，λ为横坐标。对Fe2+-phen(橙红色)溶液会图，得到吸收光谱曲线，本实验一般为510~515nm 2.标准曲线（工作曲线） A —吸光物质的吸光度为纵坐标 C —吸光物质的浓度为横坐标 五、注意事项 进行条件实验和制作标准曲线时，加入试剂的顺序不能任意改变。 应使用吸量管准确移取试剂。 六、思考题 本实验中盐酸羟胺和醋酸钠的作用分别是什么？ 吸收曲线和标准曲线有何实际意义？ 怎样用吸光光度法测定水样中总铁和亚铁的含量？ * * 无机及分析化学实验 I0 It T= A=lg s 光源 单色器 比色皿 光电元件 输出装置 仪表盘 样品室门 试样槽拉杆 波长指示窗 波长手轮 转动此手轮可选择所需波长 仪器结构-背视图 电源开关 光强旋钮 电源线插座 数显窗 T、A、C指示灯 “复位”键 反向置数键 正向置数键键 ”TAC“键 T、A、C读数显示窗，左侧发光管亮表示负号 当显示数溢出或程序执行停止、程执行紊乱时，按此键可使仪器恢复正常 按此键可循环选择三种测量模式 A 400 500 600 λ λmax 0