四川农业大学植物生理学.pptVIP

玻璃器皿 天平、烘箱、生长箱 离心机 显微镜 荧光显微镜 显微成像系统 解剖显微镜 普通显微镜 无土栽培技术 * 二、《盐胁迫对小麦幼苗生长的影响》的设计与安排 1.本实验为单因素试验，实验因素为NaCl盐胁迫溶液，设加有100mmol/L、150mmol/L、200mmol/L NaCl的完全溶液三种处理浓度，用完全溶液作对照。 2.选取适量均匀饱满的小麦种子，用0.1%升汞消毒10分钟，清水多次冲洗，25生长箱中催芽培养3~5天。 3.按下表培制好完全溶液，然后分装倒3个培养塑料杯中，在尼龙网上种植30粒萌发种子，让根浸入溶液中，放生长室培养一周后，其间注意别干水；更换上述盐胁迫处理溶液，生长室中培养一周后，进行分析测试。 盐 类 用 量（g/L） 盐 类 用 量（g/L） Ca(NO3)2·4H2O 236 微量元素 KH2PO4 27 H3BO3 2.68 KNO3 102 MnCl2·4H2O 1.81 MgSO4·7H2O 98 CuSO4·5H2O 0.08 EDTA--Fe EDTA--Fe 7.45 ZnSO4·7H2O 0.22 FeSO4·7H2O 5.57 H2MoO4·4H2O 0.09 Hoagland营养液储备液配方 Ca(NO3)2·4H2O KNO3 MgSO4·7H2O KH2PO4 EDTA--Fe 微量元素 5ml 5ml 5ml 5ml 5ml 1ml 完全营养液配制表（每1000ml加入储备液量） 4.分析测试项目 形态指标的观察记载与测量 ①观察记载植株长相、长势、吐水、叶片颜色、根系颜色； ②取20株测定苗高、3条主根长度、幼苗干重、根系干重（105℃杀青10~15分钟，70~80℃烘干至衡重，称量），计算根冠比和生长速率。 生理指标测定项目 ①根系活力测定（TTC法）：取10株的根尖（0.5cm）测定。 ②过氧化物酶活性测定（愈创木酚法）:称取1g叶片提取过氧化物酶测定。 ③叶绿素含量测定：称取0.5g叶片研磨提取，用分光光度计测定。 ④电导率测定：称0.5g剪成0.5cm的小叶块叶片蒸馏水浸泡30min钟后测定。 植物根系活力的测定----TTC法 实验目的 根系活力是衡量根系活动能力强弱的重要指标，可以衡量根系吸收水分或矿质元素的能力大小，甚至可以反映地上部分的营养状况以及产量水平。 实验原理 氯化三苯基四氮唑(TCC)是标准的氧化还原电位为80毫伏的氧化还原色素,溶于水中成为无色,但还原后生成不溶于水而呈红色的三苯甲月撍。反应如下：  生活的根系具有一定的还原力，并可以被琥珀酸、延胡索酸、苹果酸等得到加强。可以通过测定根系还原TTC的多少，反映根系活力的大小。 材料、设备及试剂 1 材料 小麦幼苗植物根系 2 设备 7200型分光光度计、分析天平、培养箱、、离心机、刻度试管（ 15?mL ）、烧杯（500mL）、镊子、刀片。 3 试剂 （1）乙酸乙酯（分析纯） （2）次硫酸钠（Na2S2O4）粉末 （3）1mg/mLTTC：准确称取TTC1.0g,溶于少量水中,定溶到1000mL,用时稀释至需要的浓度. （4）0.1mol/L磷酸缓冲液(pH=7.5) （5）1mol/L硫酸：用量筒取比重为1.84的浓硫酸55ml，边搅拌边加入盛又500ml蒸馏水的烧杯中，冷却后稀释至1000ml。 操作方法 1.标准曲线的制作 （1）取1mg/mL的T T C 2mL于100mL容量瓶中，加入2勺（黄豆大小）保险粉摇匀，加入乙酸乙酯40mL左右剧烈震荡至保险粉充分溶解，用乙酸乙酯定容至刻度，即成TTF标准液（20 μg /mL ）。 （2）按下表制作 T T F标准曲线 （3）以空白作参比，在分光光度计上测定485n m下的吸光度，绘制标准曲线。 项 目 管 号 0 1 2 3 4 5 6 7 T T F标准液（mL） 0 1 2 3 4 5 6 7 乙酸乙酯（mL） 10 9 8 7 6 5 4 3 2.样品的提取及测定 （1）样品提取 取洗净吸干水分的根尖0～0.5cm切断50条，放入小玻瓶（盛有磷酸缓冲液和0.4％T T C各2mL ），37℃保温1h，加入2mL1mol/L硫酸中止反应。 （2）根系活力测定 把根取出擦干，加入乙酸乙酯3mL迅速研磨呈匀浆状，再加7毫升的乙酸乙酯研磨均匀，转入离心管3000g离心5min,在485nm测定上清液的