骨骼肌特异性钙蛋白酶与蛋白质降解.docVIP

动物营养学报 2011, 23(4:542-545Ch i nese Journa l o f Ani m a l Nu tr iti on do:i 10. 3969/.j issn . 1006-267x . 2011. 04. 003 骨骼肌特异性钙蛋白酶与蛋白质降解 张 勇 1 邓 科 2 (1. 沈阳农业 大学畜牧兽 医学院 , 沈阳 110866; 2. 沈阳农业 大学生物科 学技术学 院 , 沈 阳 110866 摘 要 :骨骼肌特异性钙蛋白酶 ca l p ain -3是钙蛋白酶系统的一员 , 与肌细胞生成和细胞凋亡密 切相关 , 同时也被认为参与了蛋白质降解过程 。 本文主要从骨骼肌特异性钙蛋白酶的结构功能 和生理活性 , 并结合近年来国际上的研究成果来分析骨骼肌特异性钙蛋白酶在骨骼肌蛋白质降 解中的作用 。 关键词 :骨骼肌特异性钙蛋白酶 ; 肌联蛋白 ; 蛋白质降解 中图分类号 :S811. 2 文献标识码 :A 文章编号 :1006-267X (2011 04-0542-04收稿 日期 :2010-11-11 基金 项目 :国家自 然科学基金 /钙蛋 白酶调控猪体蛋 白降解的信号途 径研究 0作者 简介 :张 勇 (1972 , 男 , 甘肃武 威人 , 教授 , 博士 , 硕士生 导师 , 主要从 事分 子营 养学 与饲料 资源 开发 利用 研究。 E-m ai:l s yndzhy @ . 骨骼肌特异 性钙蛋 白酶 ca lap i n -3(又名 p94、 CAP N 3 是 钙 蛋 白 酶 (calpain 的 一 种。 calpain -3并不是肌肉生 长所必 需的蛋 白酶 , 却在 维护 肌肉 完整性中发挥了至关重要的作用。钙蛋 白酶在骨 骼肌中主要存在于 Z 线处 , calpa i n -3在骨骼肌中与 肌联蛋白 (titi n 紧 密结合 在一起。肌 联蛋白 有将 粗肌丝与 Z 线相连 , 维持肌原纤维 (m yofibril 的完 整性和稳定性 的功能 , 同 时肌联 蛋白和 伴肌 动蛋 白 (nebu lin 是 N 2线的 组分。肌原 纤维 蛋白 质降 解的第 1步必须 是肌 原纤维 分解成 肌丝 , 超 微结 构研究表明 N 2线 是宰后 钙蛋 白酶最 先降解 的结 构之一。因此本文依据近年来国际上的 研究来讨 论 ca l p ain -3在骨骼肌中的功能和作用。 1 骨骼肌特异性钙蛋白酶的结构 钙蛋白酶主要由 2种广泛存在的钙蛋白酶 (u - b i q u itous ca l p ains L -钙蛋 白酶 (L -calpai n 或 ca-l pain -1 、 m -钙 蛋 白酶 (m-calpa i n 或 calpain -2 和 ca l p a i n -3组成。前二者都由 2个亚基组成 , 分子量 相近 , 但二者表 现最高 活性所 需的钙 离子 浓度 不 同 , 前者为微摩尔级 (1~12L m o l/L, 后者为 毫摩 尔级 (250~750L m oL /L,calpa i n -3与前二者结构 相似。通过不同来源的钙 蛋白酶 c DNA 序列可 以 发现 , calpa i n -1和 ca lpa i n -3大亚 基均 由 4个 结 构 域组成 (图 1, 二者均包含域 ?、 ò、 ó和 ?, 域 ?是 N -末端域 , 域 ò是蛋 白质水解的区 域 , 域 ó的 功能未知 , 域 ?是由 4个含 E 、 F 的螺 旋 -环 -螺 旋结构 (EF -hand 组成的主要钙离子结合域。 C a-l pain -3有 3个额外 的插入区域 , 即 NS 区、 前肽 IS1区和结合肌联蛋白的 I S2区。 图 1 calpain -1和 calpain -3的结构示 意图 F ig . 1 Schem a tic d i ag ram o f t he structure s o f ca l pain -1and ca l pa i n -3p ro te i ns 4期 张 勇 等 :骨 骼肌特异 性钙蛋白酶 与蛋白质降 解 2骨骼肌特异性钙蛋白酶的活性 研究表明 , 全长度的 calpain -3是没有活性 的 , 它必须自溶 (即水解自身 删除前肽 I S1区以获得 活性 (图 1 [1]。该 自 溶 过 程 需 要 钙 离 子 的 参 与 [2]。自溶后 , 获得 1个可以 与底 物和 抑制 剂结 合的酶活性位点 [3]。通过蛋白质 电泳与免疫印迹 试验 [4], 可以观察到自溶后全长度为 94ku 的蛋白 质 , 依据钙离子浓度和 时间不同 , 可进一 步分解成 60、 58和 /或 55ku 的产物 (用抗