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- 2019-12-05 发布于广东
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根据重组率所得基因图: rII1 rII7 rII4 rII5 rII2 rII8 rII3 rII6 ___|_____|_____|____|_____|____|_____|_____|______ 它们的图距就是rII+的重组率。 ●rII基因内重组说明,基因是可以分割重组的,它由更小的单位组成,Benzer称其为重组子recon,重组可以发生在重组子之间,但不能发生在其内部。因此,重组子(而不是基因)是重组的单位,基因是重组子完整的线性序列,一对核苷酸是重组的最小单位。 第四节 突变位点分析 基因内发生重组有助于构建详细的基因图,由各种等位基因突变体杂交发生基因重组的相对频率能揭示出基因内突变位点的顺序和相对位置。 一、缺失突变体(deletion mutants) 是由于DNA上消除了某个片段所引起的突变。在以缺失突变为背景的重组试验中,突变不可能恢复到野生型。因为和那个特定突变体相对应的野生型区段的DNA已不复存在。 缺失和真正的点突变的区别: 单个位点——多个位点 可以回复——不可回复 可以重组——不可重组 二、缺失作图 deletion mapping Benzer利用在rII区域中含有短的缺失的特殊突变体来定位其它新的突变位点。 1.原理:假定一个由12个突变位点组成的基因图: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 如:有一特殊突变体D1,当它分别与带有突变点1、2、3、4、5、6、7或8的突变体杂交时不能获得rII+重组体,那么D1就是缺失1-8位点的突变体: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 缺 失 区 1 2 3 4 缺 失 区 D1 D2 Ⅰ Ⅱ Ⅲ 有另一突变体D2,当它与5、6、7、8、9、10、11或12突变位点的突变体杂交时不能获得rII+重组体。即D2就是缺失5-12的突变体。 根据重叠缺失区,可将基因分成三个区域 2.如何定位新的突变位点? (1)当与D1杂交能获得rII+重组体,与D2杂交却不能,该突变体的突变位点位于III区; (2)当与D2杂交时能够,但与D1杂交时不能获得rII+重组体,该突变位于I区; (3)与D1和D2杂交都不能得到rII+重组体,其突变位点位于II区。 杂交能否获得rII+ ? (4)缺失突变体之间也可以杂交从而象点突变那样定位,如果杂交得不到rII+重组体,那缺失区就是重叠的。例如有一缺失图: 利用上述缺失图可将新的突变定位。 思考:下图表示T4 rII A 顺反子中4个缺失突变体的缺失图。 1 2 3 4 现有在rII A中4个点突变体a-d,分别试验它们与4种缺失突变体杂交获得rII+的能力,结果如上表。 问:4种点突变的顺序是怎样排列的? a b c d 1 + + + + 2 + + + - 3 + - + - 4 - - + - Good Morning ! 思考题: 1. 有一组噬菌体缺失突变体(1—5),成对相互杂交得到下列结果(“+”表示能获得rII+重组体,“﹣”表示不能)。 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 - + - + - + - + + - - + - - - + + -
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