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一、目的要求 1、学习测定食品中霉菌、酵母菌检测程序、方法; 2、掌握霉菌、酵母菌检测结果的报告方式。 二、实验原理 霉菌和酵母菌菌数的测定是指食品检样经过处理,在一定条件下培养后,所得1g或1mL检样中所含的霉菌和酵母菌菌落数(粮食样品是指1g粮食表面的霉菌总数)。 三、实验器材 1、培养基:马铃薯-葡萄糖琼脂培养基 2、器皿:已灭菌的平皿(9套/组),1mL吸管(6支/组),试管(15×150)(6/组),三角锥瓶500mL、三角锥瓶500mL(内装蒸馏水250mL),10mL吸管 3、其他:牛皮纸或报纸,酒精灯,棉花,高压蒸汽菌锅,电烘箱,线绳,毛刷等 四、操作步骤 1、采样 选取有代表性的样品并避免采样时的污染。本实验用的是开封的脉动饮料。 (1)以无菌操作称取检样25mL,放入含有225mL灭菌水的玻塞三角瓶中,振摇30 min,即为1:10稀释液。 (2)取1mL 1:10稀释液注入含有9mL灭菌水的试管中,另换一支1mL灭菌吸量管此液为1:100稀释液。 (3)取1mL 1:100稀释液注入含有9mL灭菌水的试管中,另换一支1mL灭菌吸量管,此液为1:1000稀释液。 2、接种培养 根据对样品污染情况的估计,选择3个合适的稀释度,分别在做10倍稀释的同时,吸取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做2个平皿,然后将凉至45 ℃左右的培养基注入平皿中,待琼脂凝固后,倒置于25-28℃温箱中,3d后开始观察,共培养观察5d。 五、实验数据及结果 通常选择菌落数在10-150之间的平皿进行计数,一个稀释度使用两个平板,采用两个平板的平均数;选择稀释度也选择平均菌落数在10-150之间的稀释度,菌落平均数乘以稀释倍数,即为每克(或毫升)检样中所含霉菌和酵母数。 (1)将各稀释平板上的菌落数填入下表。霉菌测定报告 酵母菌测定报告 适合专业(群):食品加工技术专业群 教师:万国福 食品微生物技术 实训项目教程 行动领域 任务一 菌落总数测定 任务二 大肠菌群检验 任务三 霉菌、酵母菌检验 任务四 乳酸菌检验 任务三 霉菌、酵母菌检验 待琼脂凝固后,倒置于25-28℃温箱中,3d后开始观察,共培养观察5d。 稀释度 平板号 1 2 平均 1 2 平均 1 2 平均 霉菌菌落数 根据试验结果,报告检测结果: 每1mL(g)食品中的霉菌数是 。 稀释度 1:10 1:100 1:1000 稀释度 平板号 1 2 平均 1 2 平均 1 2 平均 酵母菌落数 根据试验结果,报告检测结果: 每1mL(g)食品中酵母菌数是__________。 稀释度 1:10 1:100 1:1000
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