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- 2019-12-23 发布于湖北
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国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库 国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库 国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库 国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库 国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库 国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库 国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库 国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库 国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库 耐热大肠菌检验 周小林 副教授 水处理微生物 知识点 教学内容 1.耐热大肠菌的基本性状; 2. 检测各环节操作规范。 耐热大肠菌检验 教学目标 (1)知识目标 耐热大肠菌的性状特征; 多管发酵法检验原理; 检验各环节的特征性表现。 (2)技能目标 掌握耐热大肠菌检验的总体程序; 进一步掌握乳糖发酵、EC培养发酵、伊红美蓝平板及结果报告的方法技能。 (3)素质态度要求 态度端正,积极主动学习,严守操作规范,团结协作。 耐热大肠菌检验 一、关于耐热大肠菌 耐热大肠菌群是指在EC肉汤于44.5±0.2℃培养,24h内产气的一群细菌。 不同的检验方法中定义有所不同,指的是具有某些特性的一群细菌,而非生物学分类概念。 耐热大肠菌检验 作为一种卫生指标菌,耐热大肠菌群的存在并不代表其对人有什么直接的危害。但是,作为粪便污染指标菌,耐热大肠菌群与大肠菌群相似,主要以其检出情况来判断食品是否受到了粪便污染。 耐热大肠菌群的存在表明可能受到了粪便污染,可能存在致病菌(如沙门氏菌、志贺式菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌等),水体受到粪便污染就有可能对人造成潜在的危害。 通常情况下,耐热大肠菌与大肠菌群相比,在人和动物粪便中所占的比例较大,而且由于在自然界容易死亡等原因,耐热大肠菌群的存在可认为水体直接或间接的受到了比较近期的粪便污染。因而,耐热大肠菌群在食品中的检出,与大肠菌群相比,说明水体中肠道致病菌存在的可能性更大。 耐热大肠菌群比大肠菌群能更贴切地反应水体受人和动物粪便污染的程度。 二、耐热大肠菌的检验 一般采用多管发酵法 耐热大肠菌检验总体程序、操作与大肠菌群检验差不多 耐热大肠菌检验 检验程序 EC培养发酵 培养温度44.5℃ 可以不做 耐热大肠菌检验 准备工作: (1)制备培养基 乳糖蛋白胨培养液、EMB培养基(与大肠菌检验相同) EC培养基—— 成份:胰蛋白胨或示胨 20.0g、乳糖 5.0g、胆盐混合物或3号胆盐 1.5g、磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O) 4.0g、磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.5g、氯化钠(NaCl) 5.0g、蒸馏水 1000mL。 制法:将上述成份加热溶解,分装于内装倒管的试管中,115℃灭菌20min灭菌。 (2)无菌水、培养皿、试管、移液管等参照大肠菌群检验。 抑制G+生长 耐热大肠菌检验 检验各环节操作参照“大肠菌群检验” 耐热大肠菌检验 二、任务考核 考核内容 考核指标 分值 培养基制作 是否规范 20 乳糖、EC发酵 无菌操作、整个过程操作的规范性 30 平板分离培养 划线方法、取菌前后的操作规范、划线操作规范 20 革兰氏染色 是否熟练、规范,判断是否准确 15 数量检索与报告 方法是否正确 15 耐热大肠菌检验 谢谢! 国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库 国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库 国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库 国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库 国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库 国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库 国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库 国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库 国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库
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