高二生物选修三《基因工程概念》.pptVIP

蛋白质工程的进展与前景 蛋白质工程目前的现状：成功的例子不多，主要是因为蛋白质发挥其功能需要依赖于正确的空间结构，而科学家目前对大多数蛋白质的空间结构了解很少。 作业: 蛋白质工程操作程序的基本思路与基因工程有什么不同? 蛋白质工程与基因工程相比,合成的蛋白质有何特点? 实例：利用基因工程技术生产人胰岛素 人胰岛细胞 大肠杆菌 胰岛素 mRNA A ① 人胰岛素 人胰岛素 大量的A 重复进行 ③ ④ ② ⑤ ⑥ ⑦ ⑧ ⑨ ⑩ B C D 2.过程②必需的酶是 酶，过程③一般用 方法是氢键断裂，也可以用 酶处理。 4.为使过程⑧更易进行，可用 （药剂）处理D。 3.在利用A、B获得C的过程中，必须用 切割A和B，使它们产生 ，再加入DNA连接酶，才可形成C。 皮肤细胞中的胰岛素基因未表达（或未转录），不能形成胰岛素mRNA 逆转录酶、DNA聚合酶 高温 解旋 同一种限制性内切酶 相同的黏性末端 Ca2+ 预期的蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应用的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列 1.能否利用人的皮肤细胞来完成①过程： （能、不能），为什么？ 。 5.采用蛋白质工程可以对胰岛素进行改造，使之起效时间缩短，保证餐后血糖高峰和血胰岛素高峰的一致。如果您是科研工作者，请写出研制速效胰岛素的思路： 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 和 等技术，赋予生物以新的 ，创造出更符合人们需要的新的生物 和生物 。 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术 操作环境 生物体外 操作对象 操作水平 基本过程 结果 人类需要的基因产物 基因 DNA分子水平 基因表达载体的构建 目的基因的获取 目的基因的检测与鉴定 导入受体细胞 DNA重组 转基因 遗传特性 类型 产品 基因工程的概念 z..x..x..k 基础理论和技术的发展催生了基因工程 DNA是遗传物质的证明 DNA双螺旋结构和中心法则的确立 遗传密码的破译 基础理论 技术发明 基因转移载体的发现 工具酶的发明 DNA合成和测序技术的发明 DNA体外重组的实现 重组DNA表达实验的成功 第一例转基因动物问世 PCR技术的发明 ..学..科..网. DNA重组技术的基本工具 限制性核酸内切酶——“分子手术刀” DNA连接酶——“分子缝合针” 基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” 限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 主要在原核生物中 特异性，即识别特定核苷酸序列，切割特定切点 磷酸二酯键 EcoRI限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开 分布： 作用特点： 切点： 举例： .学.科.网. 限制性内切酶 限制酶 限制酶所识别的序列有什么特点 限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。 DNA连接酶——“分子缝合针” 连接酶有两种：一种是从大肠杆菌中分离得到的，称之为E·coli连接酶。另一种是从T4噬菌体中分离得到，称为T4连接酶。 这两种连接酶催化反应基本相同，都是连接双链DNA的缺口，而不能连接单链DNA。 E·coli连接酶只能连接黏性末端； T4连接酶既可“缝合”黏性末端，又可“缝合”平末端。 基因的载体——“分子运输车” 载体必须具备的条件： 1、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存； 2、具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接； 3、具有某些标记基因，便于进行筛选。（如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等 ） 4、对受体细胞无害 载体的作用： 1、将外源基因转移到受体细胞中去。 2、利用运载体在受体细胞内，对外源基因进行大量复制。 常用的载体有： 质粒，λ噬菌体的衍生物，动植物病毒等 z.x.x.k （一）目的基因的获取 1、目的基因：编码蛋白质的基因 （1）从基因文库获取：用限制酶切割DNA,形成许多DNA片段（基因组文库) （2）人工合成法： ①反转录法：用mRNA反转录出DNA片段（cDNA） ②化学合成法：根据蛋白质的氨基酸序列，推测mRNA 序列，再推测DNA序列，然后人工合成DNA（cDNA） 2、基因文库: （1）基因组文库:一种生物所有的基因 （2）部分基因文库:一种生物的部分基因（cDNA） 3、获取方法： ① 概念：PCR全称为_______________，是一项 在生物____复制__