淀粉酶（AMY）测定标准操作程序SOP文件.docVIP

ABCD医院 生化实验室 文件编号： ABCD-SOP-04-07 淀粉酶（AMY）测定 版序：ABCD 页码：第1 页，共4 页 1 测定方法 酶动力学法。 2 测定原理 5乙酰基-G7PNP + 5H2O 淀粉酶 2乙酰基-五糖 + 2对硝基酚-二糖 + 2乙酰基-四糖 + 2对硝基酚-三糖 + 对硝基酚-四糖 在孵育中，胰腺淀粉酶将试剂中的底物4,6-乙酰基（G7）-1,4-对硝基酚（G1）-?-D-麦芽庚糖苷水解。然后，PNP-G2、PNP-G3、PNP-G4 等片断被 ?-葡萄糖苷酶裂解为PNP 以及葡萄糖。PNP 形成的颜色直接与胰腺中的?-淀粉酶呈正比例。 3 标本 3.1 血液：血清、肝素或EDTA抗凝血浆，处理方法见标本处理程序。 稳定性：20-25℃ 7天 4－8℃ 7天 3.2 尿液：不能添加防腐剂。 稳定性：20-25℃ 2天 4－8℃ ?-AMY在酸性尿液中不稳定，在存储前要将PH调节至碱性范围。 4 试剂 4.1试剂 来源：ROCHE配套 试剂（详见试剂说明书）。 贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃ R1：打开后机上稳定28天 R2：打开后机上稳定28天 准备：直接使用。 4.2 校准物 来源：ROCHE配套校准物,具体如下： S1:0.9%NaCl S2:C.f.a.s （货号：759350） 贮存条件：校准物在2-8℃ 准备：直接使用。 定标频率：A 试剂盒在仪器上放置28天后 B试剂批号更换后 C 由质控结果决定 ABCD医院 生化实验室 文件编号： ABCD-SOP-04-07 淀粉酶（AMY）测定 版序：ABCD 页码：第2 页，共4 页 4.3 质控物 来源：Precinorm (罗氏正常值质控) Precipath (罗氏病理值质控) 其它适合的质控品 贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。 准备：直接使用。 质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。 5 仪器 ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。 6 上机操作 见仪器作业指导书。 7 参考范围 U/l Ukat/l 血清/血浆 28-100 0.47-1.67 随机尿 460 7.67 ?-AMY/肌酐* 310u/g 5.17ukat/g 注：* ：?-AMY/肌酐比率，即同时检测?-AMY和Creatinine的浓度，计算出比值： 比率(U/g或者ukat/mmol)= ?-amy(U/l或者ukat/l) ÷ Crea(g/l或者mmol/l) 另外，还可计算?-AMY/肌酐的清除率(ACCR)，即同时检测的血液和尿液中的?-AMY的活性和Creatinine的浓度，计算出比值： ACCR% = （尿AMY × 血Crea）÷（血AMY × 尿Crea）× 100 ACCR的正常范围在2-5%。 8 性能指标 本法线性范围为3-1500U/l，不准确度允许范围±10%，不精密度CV=1.5%，灵敏度为3U/l。 9 注意事项 9.1 EDTA抗凝血浆的检测值大约要比血清值低8%。 9.2 唾液污染标本会对结果产生严重的影响。 9.3 R2的轻度发黄不会有干扰检测。 ABCD医院 生化实验室 文件编号： ABCD-SOP-04-07 淀粉酶（AMY）测定 版序：ABCD 页码：第3 页，共4 页 9.4血清标本出现溶血、脂血、黄疸或抗坏血酸的干扰情况参见抗干扰能力。 9.5换算公式：U/l × 0.0167 = ukat/l 9.6仅应用于体外诊断。 9.7扔弃废物应符合当地的法规。 10抗干扰能力： 10.1 标准：回收率在90％－110％之间。 10.2 黄疸：黄疸指数达到60时不会有明显干扰。（直接和间接胆红素浓度约为60mg/dl） 10.3 脂血：乳糜指数达到1500明显干扰。（甘油三酯浓度约为3000mg/dl）。 10.4 溶血：溶血指数达到500时不会有明显干扰。（血红素浓度约为500mg/dl） 10.5 葡萄糖的浓度低于2000mg/dl不会有干扰，在4500mg/dl浓度附近会造成回收率降低10%。 10.6 Vc的浓度低于100mg/dl时不会有干扰，当浓度在880mg/dl附近时会使会受率降低10%。 11 临床意义 ?-淀粉酶（1,4-?-D-葡聚糖水解酶）通过断裂1,4-?-糖苷键来催化多聚碳水化合物（如直链淀粉、支链淀粉、糖元）的水解。对于多糖或者寡糖，它能够水解几个这样的糖苷键。麦芽三糖，是其能够水解的最小单位，水解后形成麦芽糖及葡萄糖，但是速