实验二十一细菌的芽孢和荚膜染色法fg答案.pptxVIP

实验二十一 细菌的芽孢和荚膜染色法 ;一、实验目的： ;二、实验原理： ;三、实验材料： ;四、方法及步骤： ;芽孢的特点是不能繁殖，休眠体，含水少、含脂高、不透明，对外界环境有很强的抵抗能力，有的芽孢在一定条件下可保持活力数年甚至数十年之久，芽孢尤其能耐高温，像枯草杆菌的芽孢，在沸水中可存活1小时，破伤风芽孢杆菌可存活3小时，而肉毒梭状芽孢杆菌的芽孢可忍受6小时，即使在180℃干燥箱中仍可存活10分钟，这主要是2.6-吡啶二羧酸与钙的复合物占芽孢干重5-15%的原理。 芽孢有的长在中央或近中央，圆形或椭圆形，芽孢的大小，位置，在分类鉴定上有一定的意义，它仅仅是芽孢细菌生活史的一个环节，它还是检验培养基灭菌彻底不彻底的依据。 ;芽孢染色的原理是利用细菌的芽孢和菌体对染料的亲和力不同的原理，用不同的染料进行着色，使芽孢和菌体呈不同的颜色而便于区别。细菌的芽孢壁比营养细胞的细胞壁厚，致密、透性低，着色和脱色都比营养细胞困难。因此，一般采用一种碱性染料（孔雀绿）并在微火上加热或延长染色时间。我们采用加热的方法，使菌体和芽孢同时都染上色后，再用水冲洗脱去菌体的染料，此时仍保留芽孢的颜色，并用对照染料来染菌体，这样就将芽孢和菌体分别染成两种不同的颜色。其步骤如下：;⑴取枯草杆菌制成涂片、干燥、固定； ⑵用试管夹夹住玻片的一端，在涂片上滴加孔雀绿3-4滴； ⑶加热5分钟使冒蒸汽，切勿煮干； ⑷冷却、水洗（细水）； ⑸蕃红溶液复染2 -3分钟，水洗； ⑹干燥、镜检； ⑺结果：芽孢呈绿色，菌体呈红色。;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;2、荚膜染色法： 有些细菌生活在一定营养条件下，可向细胞壁表面分泌一层松散透明、疏松、柔软、粘度极大，粘液状或胶质状的物质即为荚膜。 荚膜的化学成分，主要是多糖、多肽、蛋白质、脂以及由它们组成的复合物-脂多糖、脂蛋白等。 荚膜虽不是细胞的主要结构，但它是细胞外碳源和能源性贮藏物质，并能保护细胞免受干燥的影响，同时能增加默???些病原菌的致病能力，使之抵御宿主吞噬细胞的吞噬。 ;产荚膜细菌 ，常常给生产带来麻烦，食品工业中的粘性面包，粘性牛奶，都是由于染了此类细菌引起的，对制糖工业威胁更大，由于产荚膜细菌的大量繁殖，增加了糖液粘度，影响了过滤速度，使生产蒙受损失。但在一定条件下，有害的东西可变为有益的物质，如肠膜明串珠菌，在人为控制下，让其利用蔗糖合成大量产荚膜物质—葡聚糖。葡聚糖是生产右旋糖酐的原料，而右旋糖酐是带代血浆的主要成分，具有维持血液渗透压和增加血溶量的作用，临床上还用于抗休克、消肿和解毒，所以在医学上十分重要。荚膜比菌体要大。 ;;;;;;;;实验二十二 放线菌、霉菌、酵母菌的形态观察;一、实验的目的 ;二、实验原理 ;;;;2、霉菌： 霉菌是一些“丝状真菌”的统称，不是分类学上的名词。凡是在基质上长成毛状、棉絮状或蜘蛛网状的丝状真菌统称霉菌。 霉菌形态比细菌、放线菌复杂，个体比较大，具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。因此，在观察是要注意菌丝的直径大小，菌丝体有无隔膜，营养菌丝有无假根，无性繁殖或有性繁殖时形成的孢子是哪一种，孢子是怎样着生的。 由于霉菌的菌丝较粗大，而且孢子容易飞散，如将菌体置于水中容易变形，故观察时状不用水浸法制片，而将菌体置于乳酸石炭酸棉兰染液中，使细胞不易干燥，并有杀菌作用。;三、材料 ;四、方法及步骤 ;;;;;;;;;;;;;;;;六、作业