环境微生物学第6章.pptVIP

(3) 细菌素质粒细菌素是细菌产生的一种能够抑制或杀死密切相关种群或者同一种的不同菌株的特殊物质。 目前研究得最深入的是大肠杆菌产生的大肠菌素，它是由Col质粒决定的。细菌素能与敏感细菌细胞壁上的专一性受体蛋白相结合，进而抑制或杀死敏感细菌。Col质粒有些具有接合性有些不具接合性。 (4) 降解质粒这是具有分解多种特殊有机化合物能力的因子。 降解质粒主要存在于假单孢菌中，这些质粒以分解的底物命名，包括CAM(樟脑)、OCT(辛烷)、XYL(二甲苯)SAL(水杨酸)、MDL(扁桃酸)、NAP(萘)、TOL(甲苯)等。降解质粒在自然界物质循环、环境保护和污染环境的治理方面有着重要的应用前景。 (5) 毒性质粒这是一种携带编码产生毒素基因的质粒。 如大肠杆菌可侵入小肠产生一种毒素导致腹泻，其细胞表面有一种蛋白，称为入侵因子抗原(CFA)，它是由质粒编码的。这一蛋白可保证细菌细胞吸附到肠上皮细胞。已知的各种细菌的毒素因子大部分由质粒编码，也有的由可遗传因子或噬菌体编码。 6.2.4　接合 1.接合现象的确定2.接合的机制3. F因子 4. Hfr菌株5. F′因子 1.接合现象的确定 相当长的一段时间人们认为细菌是无性繁殖，各细菌横向没有遗传物质的交换和重组，但后来一些现象证明这一观点并不正确。Lederberg和Tatum于1946年首先发现了接合现象。他们筛选出两种不同大肠杆菌营养缺陷型突变株，一株是需要蛋氨酸(met-)、生物素(bio-)，另一株需要苏氨酸(thr-)、亮氨酸(leu-)，将它们分别涂布在基本培养基上，这两个亲本菌株均不能生长，但将它们在完全培养基上混合培养后再涂布于基本培养基上却可以生长。这说明这两个营养缺陷型突变株之间进行了基因重组，在基本培养基上形成了met+、bio+、thr+、leu+的菌落。由于采用双重营养缺陷菌株，回复突变的可能性被排除，进一步的实验排除了上述结果是细菌转化作用的可能性，说明确实存在着由细胞直接接触而引起的基因重组的接合现象。 2.接合的机制 图6-12　质粒DNA的接合作用a)质粒通过性纤毛结合过程　b)质粒DNA切口 3. F因子 F因子又称F质粒，大肠杆菌的F质粒不仅具接合性，还能整合到染色体中去带动染色体转移，此时的F质粒便成为附加体。带有游离状态的F质粒的细胞成为F+，作为F+受体细胞中没有F质粒 4. Hfr菌株  图6-13　不同Hfr菌株的形成方式a)染色体上可供整后下质粒的特异位点b)整合后形成四种包含不同插入片段的Hfr细胞染色体注：由于F质粒有4个整合位点，能形成Hfr1、Hfr2、Hfr3、Hfr4四种不同的Hfr细胞。 5. F′因子 整合后的F因子有时可从染色体上脱落，但脱落时有时会发生错误切割，从而形成携带部分细菌染色体基因的质粒，这种质粒称为F′因子。当F′因子与F-细胞接合时，若F′因子上携带的细菌基因与F-细胞的染色体存在着同源性，则可发生很高频率的同源重组。 6.3　体外遗传学技术 6.3.1　限制酶6.3.2　DNA的测序及合成6.3.3　分子克隆6.3.4　载体6.3.5　DNA扩增6.3.6　体外定点诱变 6.3.1　限制酶 1.寄主的限制和修饰现象2.核酸内切限制酶的类型 6.1　突变和重组 6.1.1　突变的类型6.1.2　突变的分子基础6.1.3　遗传重组 6.1.1　突变的类型 1.基因突变2. 染色体畸变 1.基因突变 图6-1　碱基置换示意图 1.基因突变 图6-2　基因突变结果(仿Madigan等，2003)a)碱基置换　b)碱基删除或插入 2. 染色体畸变 染色体畸变是指不发生染色体数目变化而在染色体上有较大范围结构变化的变异，包括缺失、重复、易位和倒位。两条非同源染色体之间部分相连的现象叫易位(Translocation)。一个染色体的某一部分以颠倒的顺序出现在原来位置上的现象叫做倒位。发生易位时遗传物质并没有丢失，但基因的排列顺序产生变化，使后代产生突变。缺失(Deletion)指染色体丢掉了某一片段，最终直接影响基因的排列顺序及其相互关系。 6.1.2　突变的分子基础 1.自发突变(Spontaneous mutation)2.诱发突变(Induced mutation)3.定点诱变4. DNA的修复机制 1.自发突变(Spontaneous mutation) 图6-3　腺嘌呤互变异构导致碱基错误配对a)正确配对　b)错误配对 2.诱发突变(Induced mutation) 图6-4　紫外辐射对DNA的破坏和DNA的修复 3.定点诱变 对基因组的特异位点进行诱变的过程称为定点诱变。当DNA序列已知时，体外诱变现在经常采用的办法是精确改变DNA序列，以化学合成的一个