杭太俊-药物分析15章甾体激素类药物分析.pptVIP

Company Logo 第二节 Identification 五、TLC 制剂分析 对照品法 炔诺酮 六、HPLC Company Logo 第三节 Purity Test 一、TLC 地塞米松磷酸钠中杂质检查 Company Logo 第三节 Purity Test 氢化可的松中其他甾体检查 对照品 60μg/ml 供试品 3.0mg/ml CHCl3-MeOH(9:1) 溶剂 硅胶GF254 二氯甲烷-乙醚-甲醇-水 385 :60 : 15 : 2 展开后晾干 105℃干燥10min 碱性四氮唑蓝显色 Company Logo 对照溶液——0.02mg/ml 供试液——1 mg/ml 二、HPLC 第三节 Purity Test 黄体酮中有关物质检查 供试品溶液的杂质峰数不得超过1个，其面积不得大于对照液的主峰面积的3/4 Company Logo 第三节 Purity Test 三、硒的检查 来源 合成中用二氧化硒(SeO2)脱氢 四、溶剂残留 甲醇和丙酮(GC) 0.3% 0.5% Company Logo 第三节 Purity Test 五、游离磷酸盐检查 钼酸铵 磷钼酸 740nm，UV Company Logo 第四节 Assay HPLC UV 比色法 非水溶液滴定法 四氮唑比色法 异烟肼比色法 柯柏反应比色法 Company Logo 第四节 Assay 一、HPLC 对照液 供试液 己烯雌酚 黄体酮 Company Logo 第四节 Assay 二、UV 醋酸地塞米松 Company Logo 第四节 Assay 三、比色法 肾上腺皮质激素类 OH - [还原] 2,3,5-Triphenyltatrazolium chloride TTC (Red tatrazoline RT) 甲潜(Formazan) 深红色 λmax 480~490nm Company Logo 第四节 Assay Blue tetrazoline BT BT-单甲潜 BT-双甲潜 蓝色 λmax 525nm Company Logo 氢化可的松软膏的含量测定 第四节 Assay 精密量取对照品溶液及供试品溶液各1ml，分别置干燥具塞试管中，各精密加无水乙醇9ml与氯化三苯四氮唑试液1ml，摇匀，各再精密加氢氧化四甲基铵试液1ml，摇匀，在25℃的暗处放置40min～45min，在485nm的波长处分别测定吸收度，计算，即得 影响因素 基团 溶剂与水分 碱 空气中氧与光线 温度与时间 Company Logo 第四节 Assay （1）基团对反应速度的影响 C11= O＞ C11－OH C21－OH＞ C21-酯 C16无论何种取代基ν↓ （2） 溶剂、水分的影响 含水量＞5%→ν↓ 含水10%→A↓10% 含水30%→几无反应 — 无水乙醇(无醛) Company Logo 第四节 Assay （3） O2与光线的影响 （4）碱的种类及加入顺序 反应应在强碱性（pH13.75）条件下进行 以氢氧化四甲基铵的结果最佳 （5） 温度与时间 t℃↑→ν↑→甲瓒分解↑→%↓ Company Logo (二)异烟肼法(Isonicotinic acid hydrazide) 第四节 Assay INH △4-3-酮 Isonicotinic acid Hydrazide Company Logo 第四节 Assay 影响因素 （1）反应速度 C3= O ＞ C17= O 、 C20= O C11= O 不反应 专属性强 （2）溶剂的选择 异烟肼盐酸盐→甲醇、乙醇 无水 （3）水分、O2与光线的影响 含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓ 不挥发溶剂、不吸收水分时→ O2与光线无影响 Company Logo 第四节 Assay (4)酸、异烟肼的量 盐酸 : 异烟肼 = 2 : 1 酸度↑→ 异烟肼盐↓ 酸度↓→ A↓ 样品 : 异烟肼 = 1 : 8 →ν↑ (5)温度 t℃ ↑ → ν↑ Company Logo 第四节 Assay (三) Kober反应比色法 Company Logo 第二步反应 515 465 450 500 550 nm A Kober 反应吸收光谱 第一步反应 第四节 Assay 采用本法测定炔雌醇片及复方炔诺酮片、复方炔诺孕酮滴丸、复方左炔诺孕酮片中的炔雌醇的含量 Company Logo 第四节 Assay 四、非水滴定——米非司酮 五、生物样品中的甾体激素的分析 Doping control 滥用药物检测 刺激剂 麻醉剂 β-阻断剂 利尿剂 遮蔽剂 合成类固醇及β2激动剂 肽类