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DNA 复制(细胞内复制)转录翻译PCR 技术(体外 DNA 复制技术)概念场所DNA 分子首先解开双链以 DNA 的一条链为模板按照碱基互补配对原
DNA 复制(细胞内复制)
转
录
翻
译
PCR 技术(体外 DNA 复制技术)
概念
场所
DNA 分子首先解开双链以 DNA 的一条
链为模板按照碱基互补配对原则合成
RNA 的过程
PCR 技术是一项在生物体外复制特定 DNA 片段的核酸合成技术。
细胞核、线粒体、叶绿体
细胞质(核糖体)
细胞核、线粒体、叶绿体
原料
4 种游离核糖核苷酸
20 种游离氨基酸
体外
4 种游离脱氧核苷酸
模板
4 种游离脱氧核苷酸
酶
DNA 中的一条链
mRNA
解旋酶、RNA 聚合酶等
目的基因(或目的基因的两条链)
DNA 分子中的两条链
不要求 氨基酰 tRNA 合成酶、氨肽酶等
能量
耐热 DNA 聚合酶(Taq 酶)
解旋酶、DNA 聚合酶等(DNA 连接酶)
ATP
ATP
ATP
模板
去向
不需要 ATP,能量来自外界加热
转录后,模板链与非模板链重新形成双
螺旋结构
分解成核糖核苷酸
DNA 复 制是 指 DNA 双 链 在 细 胞分 裂 以 前进 行 的复制过程 ,复 制的 结 果是 一 条双 链 变成两条一 样的 双链 ( 如果 复 制过 程 正常的话), 每条 双链 都 与
原 来的 双 链一样
特点
产物
一条 mRNA 可与多个核糖体结合翻译成
多条相同的多肽链
扩增后,模板链与新合成的子链形成具 有双螺旋结构的目的基因
1、半保留复制;2、快速大量复制
复制后,模板链与新形成的子链形成双
螺旋结构
边解旋边转录
蛋白质(多肽链)
形成两个完整的 DNA 分子
三种单链 RNA
过程
短时间内形成大量的目的基因
1、边解旋边复制;2、半保留复制
1、解旋:在解旋酶作用下,利用 ATP 释放的能量解开双螺旋;2、以解开的
原则,游离的核糖核苷酸与脱氧核苷酸
键连接成 RNA(mRNA,tRNA,rRNA )
mRNA 从核孔进入细胞质,与核糖体结 合,从起始密码子(AUG)开始翻译。 tRNA 一端携带氨基酸进入核糖体.另 一端的反密码子与 mRNA 上的密码子配
对,两氨基酸间形成肽键。核糖体继续
至终止密码结束,肽链形成
1、解旋:在解旋酶作用下,利用 ATP 释放的能量解开双螺旋;2、在 DNA 聚
把游离的脱氧核苷酸连接到模板链上,
3、沿着模板链不断延伸,最终形成两 个一模一样的 DNA 分子。
合酶的作用下,按照碱基互补配对原则, 一条 DNA 链为模板,按碱基互补配对
并使脱氧核苷酸之间过磷酸二酯键连接; 配对,3、核糖核苷酸间通过磷酸二酯
DNA 复制、转录、翻译以及 PCR 技术比较
以 mRNA 为模板,以 tRNA 为运载工
具.合成具有一定氨基酸顺序的蛋白质 的过程
整理:李秀志
编号:
1、变性:即加热至高温使得目的基因
的双链打开(解旋,但不需要解旋酶);
2、退火
(复性):降温使得解开的两条
链分别与引物结合;3、延伸:在 Taq
酶的作用下,按碱基互补配对原则,脱
沿 mRNA 移动,每次移动一个密码子, 氧核苷酸之间过磷酸二酯键连接成新链。
重复上述三步,就能获得大量的目的基 因。
二、在基因过程的各种检测和鉴定:
1、标记基因:为了检测目的基因(目的基因表达载体)是否导入受体细胞; 3、用 DNA 分子杂交法:检测目的基因是否转录出 mRNA(工具:基因探针);
2、用 DNA 分子杂交法:检测目的基因是否插到染色体 DNA 上(工具:基因探针) 4、用抗原—抗体杂交法:检测 mRNA 是否翻译出蛋白质;
5、鉴定:个体水平鉴定:比如抗虫实验。
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