高中生物选修一生物技术实践专题5DNA与蛋白质技术.pptVIP

　　一、DNA的粗提取与鉴定 　　1.实验材料的选择： 选用DNA含量相对较高的生物组织，如鸡血、菜花、洋葱等。 　　2.提取原理：DNA与杂质的溶解度不同，DNA与杂质对酶、高温、洗涤剂的耐受性不同。;　　3.步骤： 　　（1）破碎细胞：动物细胞（以鸡血为例），加入蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液。植物细胞（以洋葱为例），加入洗涤剂和食盐 ，充分研磨和搅拌，过滤后收集研磨液。 　　（2）去除杂质：利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中 溶解度 不同，去除杂质。 　　（3）DNA析出：在处理后的滤液中加入 等体积、冷却的酒精 溶液，析出DNA。 　　（4）DNA的鉴定：加入 二苯胺 试剂，沸水浴，出现浅蓝色。;　　二、PCR技术：全称是 多聚酶链式反应。 　　1.PCR原理：利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。 　　2.PCR反应的条件：①缓冲液；② DNA模板； ③ 两种引物； ④四种脱氧核苷酸；⑤Taq DNA聚合酶。 　　3.PCR的反应过程 （1）变性：温度上升到90℃以上，双链DNA在热作用下，氢键断裂，形成两条单链DNA。 （2）复性：温度下降到50℃左右，两种引物通过碱基互补配对原则与两条单链DNA结合。 ;　　（3）延伸：温度上升到 72℃ 左右，在 TaqDNA聚合 酶的作用下，以 四种脱