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（4）计算K值：根据样品量10μl，第一试剂200μl，第二试剂100μl，代入计算公式 则K = = = 4984 也可以采用肌酸激酶的校准品，执行校准程序来得到校准K值。 4．对新设置的反应参数进行试运行 在开始运行时，分析仪会对各反应参数之间的逻辑合法性进行检测，如果反应参数中出现逻辑性错误，则分析仪会显示错误信息并停机，这时可以根据提示信息对反应参数进行修改。 第四节　自动生化分析仪 工作过程和操作方法 一、工作过程 在测定过程中所有机械步骤均由微处理器根据已设定的程序（procedure）进行工作。 1．取样加试剂和混匀 　样品盘转动使样品进入待测位置 样品针定量吸取样品加入一反应杯 反应盘旋转 试剂转盘转动使所需试剂瓶进入试剂吸取位置 试剂针定量吸取试剂加入反应杯 搅拌机构将反应杯内液体进行搅拌混匀 2．保温反应和吸光度检测 反应盘旋转 反应杯内液体在恒温条件下进行化学反应 当该反应杯通过检测窗口时被检测得到一个吸光度值 按规定的间隔时间检测吸光度值直至总反应结束 总反应时间一般为10min，如果18s为检测吸光度的间隔时间（interval time），则10min得到34个吸光度值，若15s为间隔时间，则得到40个吸光度值。 2．固定时间法 　苦味酸法测定肌酐采用此法。 3．连续监测法 对于酶活性测定一般应选用连续监测法，如：丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、γ谷氨氨酰基转移酶、淀粉酶和肌酸激酶等。一些代谢物酶法测定的项目如：脲酶偶联法测定尿素等，也可用连续监测法。 4．透射比浊法 透射比浊法可用于测定产生浊度反应的项目，多数属免疫比浊法，载脂蛋白、免疫球蛋白、补体、抗“O”、类风湿因子，以及血清中的其他蛋白质如前白蛋白、结合珠蛋白、转铁蛋白等均可用此法。 第三节 分析参数设置 各种测定项目的分析参数（analysis　paramete）大部分也已设计好，存于磁盘中，供用户使用；目前大多数生化分析仪为开放式，用户可以更改这些参数。生化分析仪一般另外留一些检测项目的空白通道，由用户自己设定分析参数。因此必须理解各参数的确切意义。 一、分析参数介绍（一）必选分析参数 1．试验名称（test code） 2．方法类型（也称反应模式）(assay mode) 3．反应温度　 4．主波长（primary wavelength）　　 5．次波长（secondary wavelength） 6.反应方向（response direction） 7．样品量（sampling volum） 常量、减量和增量。 8．第一试剂量 （first reagent volum） 一般20-300μl 9．第二试剂量（second reagent volum）同上。 10．总反应容量（total reacting volum） 一般180-350μl，个别仪器能减少至120μl。 11．孵育时间（incubate time） 12．延迟时间（delay time） 13．连续监测时间 （continuous monitoring time）一般为60～120s，不少于4个吸光度检测点（3个吸光度变化值） 14．校准液（calibrator）个数及浓度 15．校准K值（calibrate coefficient）或理 论K值 16．线性范围（linearity range）　 17．小数点位数（decimal point digit） （二）备选分析参数 　 这类分析参数与检测结果的准确性有关，一般来说不设置这类分析参数，分析仪也能检测出结果，但若样品中待测物浓度太高等，检测结果可能不准确。 1．样品预稀释 　设置样品量、稀释剂量和稀释后样品量三个数值，便可在分析前自动对样品进行高倍稀释。 2．底物耗尽值（substrate exhaust limit）　 在负反应的酶活性测定中，可设置此参数，以规定一个吸光度下降限。若低于此限时底物已太少，不足以维持零级反应而导致检测结果不准确。 3．前区检查　免疫比浊法中应用，以判断是否有抗原过剩。将终点法最后两个吸光度值的差别（ΔA）设置一个限值，如果后一点的吸光度比前一点低，表示已有抗原过剩，应稀释样品后重测。 4．试剂空白吸光度范围　超过此设定范围表示试剂已变质，应更换合格试剂。 5．试剂空白速率　连续监测法中使用，是试剂本身在监测过程中没有化学反应时的变化速率。 6