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高考总复习 . 生物 选修 3 现代生物科技专题 专题 1 基因工程 高考总复习 . 生物 基础梳理 高考总复习 . 生物 DNA 重组技术的基本工具 1. 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过 __________ 和 __________ ,赋予生物以 __________ 的 遗传特性,创造出符合人们需要的新的生物类型和生物产 品。基因工程是在 __________ 上进行设计和施工的,又 叫做 __________ 。 DNA 重组技术 体外 DNA 重组 转基因技术 新 DNA 分子水平 高考总复习 . 生物 归纳整合 一、基因工程的概念 基因工程的别名 基因拼接技术或 DNA 重组技术 操作环境 生物体外 操作对象 基因 操作水平 DNA 分子水平 基本过程 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 结果 人类需要的基因产物 高考总复习 . 生物 2. 基因工程的基本工具 (1 )“ 分子手术刀 ”—— __________ ①来源:主要是从 __________ 中分离纯化出来的。 ②功能:能够识别双链 DNA 分子的某种 __________ 的核 苷酸序列,并且使每一条链中 __________ 部位的两个核 苷酸之间的 __________ 断开,因此具有 __________ 性。 ③结果:经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形 式: __________ 和 __________ 。 专一(特异) 限制性核酸内切酶(限制酶) 原核生物 特定 特定 磷酸二酯键 黏性末端 平末端 高考总复习 . 生物 (2 )“ 分子缝合针 ”—— __________ ①两种 DNA 连接酶( E · coli DNA 连接酶和 T 4 -DNA 连接酶 )的比较: a. 相同点:都缝合 __________ 键。 b. 区别: E · coliDNA 连接酶只能将双链 DNA 片段互补的 __________ 之间的磷酸二酯键连接起来;而 T4DNA 连接 酶能缝合 _____________ 。 ②与 DNA 聚合酶作用的异同 :DNA 聚合酶只能将 __________ 加到 已有的核苷酸片段的末端 ,形成磷酸二 酯键。 DNA 连接酶是连接 __________ 的末端,形成磷酸 二酯键。 DNA 连接酶 磷酸二酯 黏性末端 两种末端 单个核苷酸 两个 DNA 片段 高考总复习 . 生物 (3 )“ 分子运输车 ”—— __________ ①运载体具备的条件 : a. 能在受体细胞中复制并稳定保存 ( 自我复制或整合到染色 体 DNA 上随染色体 DNA 的复制而复制)。 b. 具有一至多个限制酶切点,供外源 DNA 片段插入。 c. 具有标记基因,供重组 DNA 的鉴定和筛选。 ②最常用的运载体是 __________, 它是一种裸露的、结构 简单的、独立于 __________ 核区 DNA 之外,并具有 __________ 的双链 __________DNA 分子。 ③其他运载体: __________ 、 __________ 。 动、植物病毒 载体 质粒 细菌 自我复制能力 环状 λ 噬菌体的衍生物 高考总复习 . 生物 考点二 基因工程基本操作程序分析 一、目的基因的获取(基础) 1 .从基因文库中获取。 基因组文库和 cDNA 文库的比较(略) 2 .人工合成目的基因 常用的方法有: (1) 已知核苷酸序列的较小基因,直接利用 DNA 合成仪用化 学方法合成,不需要模板。 (2) 以 RNA 为模板,在逆转录酶作用下人工合成。 高考总复习 . 生物 3 、 PCR 技术扩增目的基因 ①原理: __________ 。 ②过程 第一步:变性: __________ ;第二步:复性:引物结合到 互补 DNA 链;第三步:延伸:在热稳定 DNA 聚合酶作用下, 从引物起始合成互补链。 ③条件:模板 DNA (目的基因)、 ATP 、四种脱氧核苷酸、 和耐高温的 DNA 聚合酶( Taq 酶) DNA 解链 DNA 双链复制 高考总复习 . 生物 ? 二 . 基因表达运载体的构建(核心步骤) ? (1) 目的:使目的基因在受体细胞中 __________
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