乙酰丁香酮在农杆菌介导的遗传转化中的作用机制及应用_图文_百.docVIP

安徽农业科学.Journal of Anhui Agri.Sei.2010,38(5:2229—2232责任编辑熊章琴责任校对卢瑶 乙酰丁香酮在农杆菌介导的遗传转化中的作用机制及应用 邓艺1”,曾炳山2,赵思东1,刘英2,裘珍飞2,李湘阳2,王曙1 (1.中南林业科技大学林学院,湖南长沙410004;2.中国林业科学研究院热带林业研究所,广东广州510520 摘要 乙酰丁香酮(AS是一种酚类化合物,可诱发农杆菌内Ti或Ri质粒DNA上Vir区基因的活化和高效表这,现已被广泛应用于农 杆菌介导的遗传转化中。从As在遗传转化中的作用机理、应用历史和其影响因素等方面进行了综述,并提出今后的研完方向,以期为 AS在遗传转化中的应用提供理论依据。 关键词 乙酰丁香酮;遗传转化;作用机制;应用 中图分类号￥312文献标识码A 文章编号0517—6611(20lo05—02229一04 Mechanism and Application of Acetosyringone in Agrobacterium-mediated Transformation DENG Yi et al(College of}orestry,Central South University of Forestry and Technology,Changsha,Hunan 410004 Abstract Acetosyrlngone(ASis a kind of phenolic compound which can induce the activation and efficient expression of Vir gene in Agrobac-terium Ti or Ri plasmid.It is extensively used in Agrobacterium—mediated transformation now.The affecting mechanism.application history and im? pact factors of AS on genetic transformation were reviewed,and the research direction in the future were proposed,which provided some theory ha- sis for the application of AS on transformation. Key words Acetosyringone;Genetic transformation;Affecting mechanisms;Applieation 农杆菌介导的遗传转化作力一种天然的植物基冈转化 系统,具有转化的外源DNA结构完整、转化机理清楚、整合 位点稳定、拷贝数低、整合后的外源基因结构变异小等优点, 已成为植物转基因策略中的首选方法,建立高效的遗传转化 体系则成为一个十分重要的研究领域。 研究证明,宿主植物细胞能分泌某些酚类化合物,可诱 发农杆菌内Ti或Ri质粒DNA上VirⅨ基|太J的活化和高效 表达,促进农杆菌T-DNA向宿主细胞核转移,从而提高遗传 转化效率。其中常用且诱导效果最佳的是乙酰丁香酮 (AS,由Stachel等从代谢活跃的烟草根、叶愈伤组织的提取 物中分离得到…。近年来,As被广泛应用于植物遗传转化 中,取得了较好的效果,使得农杆菌介导的遗传转化方法更 加完善。笔者简要综述了AS提高植物遗传转化率的作用机 理、影响因素及其应用,并提出了自己的一些见解,为提高 AS在遗传转化中的使用效率提供一些参考。 1AS的作用机理 植物和微生物可以通过一些化学物质分子,以化学的方 式发生相互作用。早在1984年,Shaw等的试验表明,农杆菌 对酚类化合物具有趋化性,而且这种趋化性依赖于v/rA和 virG基因12J。Stachel等发现烟筝叶子的受伤部分比非受伤 叶子具有明显的诱导作用,并从受伤植物细胞中分离提取出 了AS,将其作为趋化物来识别…。近年来,随着研究的深 人,AS的作用机理也越来越清楚,为AS在遗传转化中的应 用和遗传转化率的提高奠定了基础。 AS作为诱导性最好的酚类化合物,其作用机理主要是 通过诱导农杆菌Vir区基因的活化与表达,促进T.DNA的加 工与转移,从而使农杆菌T.DNA更易进入植物基冈组并与 其整合。农杆菌Ti或Ri质粒的Vir区编码产物负责接收外 基金项目 国家林业局“948”引进项目(2006-4-70;中国棘业科学研究 院热带林业研究所基础科研项目(2007.23。 作者简介邓艺(1984一,女,湖南常德人,硕士研究生,研究方向:林 业生物技术。 鸣 谢 中国林科院热带林业研究所的王旭老师和陈