模块五 植物脱毒技术.pptVIP

植物脱毒技术 知识目标 能理解无病毒苗培养的意义； 理解组织培养脱毒的原理； 学会组织培养脱毒的方法和培养流程； 学会病毒的科学检测方法； 学会解剖镜的使用； 学会马铃薯微型薯生产技术； 能理解无病毒苗木及种质资源的保存和利用方法。 技能目标 脱毒种薯生产 2．茎尖培养脱毒 （1） 取材和培养 一般多采用在室内发芽，芽经热处理（38℃）2周。然后取顶芽或侧芽1厘米的茎尖，在自来水下冲洗干净，无菌条件下先用70％的酒精浸润组织15-20秒，再用2％的次氯酸钠溶液浸泡4～5min，然后用无菌水冲洗3次。 脱毒种薯生产 把消毒好的芽放在解剖镜下仔细剥离，逐层剥去幼叶，露出圆滑的生长点，可以留1～2个叶原基，0.2～0.3毫米，随即接种于MS液体培养基上，每升加0.1mgNAA、0.2mgGA3、0.5BA，2%蔗糖，pH值5.8。 脱毒种薯生产 培养条件：21～25℃、2000～3000lx、12h/d。2～3周愈伤，4～5周绿点，3～6月长成2～3厘米小芽，越慢越好，出芽很快的扔掉。 任务小结 去除植物病毒的方法有热处理法、微茎尖培养法、愈伤组织培养法和茎尖微体嫁接法。 前两种是主要方法。 热处理法去除植物病毒可力，为温汤浸渍处理法和热处理法。其中后者因不损伤植物材料，因而是目前最为常用的方法。 任务小结 病毒主要分布于植物体成熟和衰老的组织及器官中，靠维管束传播。由于茎尖尚未形成维管束，所以茎尖一般是无毒的，可用于组织培养无毒苗。 无毒苗的鉴定方法主要有：①指示植物鉴定法；②抗血清鉴定法；③电子显微镜检查法；④酶联免疫鉴定法。其中，最后一种是目前比较精确和常用的鉴定方法。 网室内，铺6厘米蛭石，3%撒可富稀释一倍，喷潮湿即可。 插前浇水湿润，插后浇透。覆膜一周（但不要压紧），湿度80%以上，期间喷水2次。揭膜后喷营养液撒可富3%，喷水冲洗（每周2次），每周喷一次0.5%硫酸铜（叶面），中后期喷药防病，防早疫、晚疫病，连续喷2-3-4次。喷辛硫磷防害虫。 苗高6—8厘米培蛭石防绿薯，1-2厘米厚，约35-40天出现气生薯，不断盖蛭石。 微型薯生产： 微型薯生产 1、指示植物鉴定 在马铃薯的病毒鉴定中，汁液鉴定是最常用的方法，Ｘ病毒、Ｓ病毒和纺锤块状病毒很容易通过汁液来接种。 2、鉴定寄主的准备 马铃薯常用的鉴定寄主植物有苋科的千日红，茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。寄主植物应在无虫网室中培养。 三、马铃薯无病毒苗的鉴定材料 ３.接种液制备及接种 叶片洗净后。在消毒的研钵中研成糊状，用纱布滤出汁液，再用蒸馏水稀释１０倍作为接种物，在鉴定寄主植物的叶面，６００目的金刚砂混入接种物中，然后用左手心紧靠在寄主的背面，以右手实指蘸取接种液，均匀的在叶背面擦过，以不造成叶片产生伤痕为度，最后把叶面上多余的接种物用清水冲洗干净，放置在１５～２４的防虫室中，一般５～１０天可发病。 三、马铃薯无病毒苗的鉴定材料 1．无病毒株的繁殖 通过茎尖培养只能得到很少的无病毒植株，而生产上需要数以万计的健康种薯。同时无病毒植株并没有对该病毒获得免疫能力，仍会在繁殖中再次侵染。如何在以后繁殖中防止受病毒再侵染是很关键的一环。目前在生产上来用的方法很多，下面介绍主要的几种。 四、马铃薯无病毒株的繁殖和保存 （１） 直接块茎繁殖 （２） 扦插繁殖 （３） 组织培养切段繁殖 A：继代培养 B：低温保存 四、马铃薯无病毒株的繁殖和保存 1 2 3 4 马铃薯的组织培养 马铃薯的组织培养 马铃薯的组织培养 1 2 3 4 5 6 7 掌握马铃薯脱毒培养的大致过程，了解马铃薯脱毒苗的鉴定方法; 掌握马铃薯的生物学习性： 熟悉微型薯的生产过程 1 3 2 微型薯 任务导入 以草莓为例介绍“脱毒” 视频 任务导入 任务导入 马铃薯是一种全球性的重要经济作物。适应性广，营养价值高，耐贮藏适运输，既是一种重要的粮食作物也是一种调节市场供应的重要蔬菜。马铃薯原产于拉丁美洲，当被发现可以食用后，很快传到世界各地，成为栽培很广的一种作物。 任务导入 但是，当发现从外地引种栽培1～2个周期后，明显发现产量降低，植株变矮，并有卷叶的现象产生，经检测证明这是由于病毒引起的退化现象。 任务导入 危害马铃薯的病毒有17种之多，如X病毒、S病毒、Y病毒、M病毒、A病毒、花叶病毒、纺锤形块茎病毒等。由于马铃薯是无性繁殖作物，病毒逐代积累，日益严重，引起严重退化。马铃薯病毒可使块茎产量减少50%～80%。 法国Morel和他的同事们，1955年从患病马铃薯植株中选取到了无病植株，为治疗作物病毒开辟了新途径。 任务导入 一、特性和生物学习性