模块二 培养基的配制.ppt

模块二 培养基的配置 单元一 母液的配制 知识目标 技能目标 掌握基本培养基的配制的配方。 掌握培养基母液的配制方法和步骤。 任务讲解 第一节 培养基的种类 　　　培养基是植物组织培养的重要基质。在离体培养条件下，不同种植物的组织对营养有不同的要求，甚至同一种植物不同部位的组织对营养的要求也不相同，只有满足了它们各自的特殊要求，它们才能很好地生长。因此，没有一种培养基能够适合一切类型的植物组织或器官，在建立一项新的培养系统时，首先必须找到一合适的培养基，培养才有可能成功。 第一节 培养基的种类 　　　培养基有几十种，根据不同植物和部位选用不同的培养基。 　　　培养基的产生最早是Knop（1681），以后根据不同目的进行改良产生了多种培养基。White培养基在40年代用得较多，现在还常用。而到60和70年代则大多采用MS等高浓度培养基，可以保证培养材料对营养的需要，并能生长快、分化快，且由于浓度高，在配制、消毒过程中某些成分有些出入，也不致影响培养基的离子平衡。 第一节 培养基的种类 　　培养基的名称，多数以发明人的名字来命名，如White培养基，Murashige和Skoog培养基（简称MS培养基）。 目前国际上流行的培养基有几十种，常用的培养基及特点如下： 　　（1）MS培养基 它是1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。特点是无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液。 第一节 培养基的种类 　　（2）B5培养基是1968年由Galmborg等为培养大豆根细胞而设计的。其主要特点是含有较低的铵，这可能对不少培养物的生长有抑制作用。从实践得知有些植物在B5培养基上生长更适宜，如双子叶植物特别是木本植物。 　　（3）White培养基是1943年由White为培养番茄根尖而设计的。1963年又作了改良，称作White改良培养基。其特点是无机机盐数量较低，适于生根培养。 第一节 培养基的种类 　　（4）N6培养基 是1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的。其特点是成分较简单，KNO3和（NH4）2SO4含量高。在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药培养和其他组织培养。 第二节 培养基的成分 水 无机盐：大量元素 微量元素 有机化合物：碳源  维生素 氨基酸 植物激素 天然提取物 琼脂  其它：PH值、活性炭、抗生素、抗酚类物质污染的添加剂、生长抑制剂、染色剂… 视频2-1 培养基成分 1.水 1.水 　　　水是植物原生质体的组成成分，也是一切代谢过程的介质和溶媒。它是生命活动过程中不可缺少的物质。配制培养基母液时要用蒸馏水，以保持母液及培养基成分的精确性，防止贮藏过程发霉变质，大规模生产时可用自来水。但在少量研究上尽量用蒸馏水，以防成分的变化引起不良效果。 2.无机元素 　　　　元素名称　　　　　　添加形式 　　　　　　N　　　　　　KNO3　NH4NO3 　大量　　　P　　　　　　KH2PO4　NaH2PO4 　元素　　　K　　　　　　KCl　　　KNO3 （≥0.5mmol/L） Ca　　　　　CaCl2 ·2H2O 　　　　　　Mg　　　　　　Mg2SO4 · 7H2O 　　　　　　S　　　　　　　Mg2SO4 · 7H2O 　　　　　　Fe　　　　　　　FeNa2-EDTA 　微量　　　B　　　　　　　　H3BO3 　元素　　　Mn　　　　　　　MnSO4 （≤ 0.5mmol/L）Cu　　　　　CuSO4 　　　　　　Mo　　　　　　Na2MoO4 · 2H2O 　　　　　　Cl　　　　　　　CaCl2 ·2H2O 2.无机元素 总之，植物必需营养元素可组成结构物质，也可是具有生理活性的物质，如酶、辅酶以及作为酶的活化剂，参与活跃的新陈代谢。此外，在维持离子浓度平衡、胶体稳定、电荷平衡等电化学方面起着重要作用。当某些营养元素供应不足时，愈伤组织表现出一定的缺素症状。 3.有机化合物 a.碳水化合物 选用种类：蔗糖（或葡萄糖、果糖）等。 蔗糖浓度：2－3%，胚培养为4－15% 高压灭菌部分糖会分解。 大生产时可用白砂糖。 b.维　生　素 种类： VB1、 VB6、 VB3、Vc 浓度：0.1－1.0mg/L　 作用： VB1 [盐酸硫胺素]　促愈伤组织产生，提高活力。 VB6 [盐酸吡哆醇] 促根生长。　 VB3 [烟酸] 与代谢和胚发育有关。