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分子标记在花生上的应用现状及前景 作物遗传育种 周金超 导师：刘立峰 Introduction 花生 ( Arachis hypogaea )(2n=4x=40) 是世界范围内广泛栽培的油料与经济 作物 , 是 20 世纪全球最重要的四大油 料作物之一。花生种仁中脂肪和蛋白 质占 80% 以上 , 含有人类必需的 8 种氨 基酸以及脂肪酸亚油酸 , 另外含有铁、 钙、锌等矿质元素 , 素有“长寿果” 之美称。 ?? Introduction 我国在世界花生生产中占有极为重要 的地位 , 1993 年以来花生总产和消费量稳 居世界之首。基于花生在国民经济和人民 生活中所占的重要地位 , 其遗传研究一直受 到广泛重视。常规育种方法存在 育种周期 长 、对目标单株的 选择效率低 、 成本高 等 难以克服的缺点。利用分子标记，可以在 DNA 分子水平上科学地选配育种亲本，利 用与重要目标性状连锁的分子标记则可以 对杂种后代进行科学的选择。 Introduction 花生在形态、生理、农艺性状等方面存在 着丰富的变异，而在 DNA 分子水平上揭示的 多态性较少。由于花生 遗传背景的复杂性 ， DNA 多态性的限制 ，这个极大的限制了分子 标记辅助选择在花生育种上的应用。目前 花生 DNA 分子标记研究明显落后于其他作物。 因此，筛选花生多态性标记是花生育种的 工作重点。 分子标记的 优点 利用分子标记 , 可以在 DNA 分子水平上 科学地选配育种亲本、利用与重要目标性状 连锁的分子标记则可以对杂种后代进行科学 的选择 , 而且不受环境条件和作物生育期的 影响 , 鉴定结果稳定可靠 , 具有选择效率高、 准确性高、成本低等优点 , 可大大缩短育种时 间。 花生育种中常用的分子标记种类 1. 基于 Southern 杂交的分子标记 RFLP ： restriction fragment length polymorphism 小卫星 DNA ： minisatellite DNA 2. 以 PCR( 聚合酶链式反应 ) 为基础的分子标记 RAPD ： random amplified polymorphic DNA SSR: simple sequence repeat SCAR ： sequence characterized amplified regions AFLP ： amplified fragment length polymorphism SRAP ： sequence related amplified polymorphism 分子标记在花生中的应用 1. 遗传多样性的研究 2. 抗性的研究 3. 杂交后代的鉴定 4. 构建花生遗传图谱 5. 花生油酸 / 亚油酸比值 ( O/ L) 的研究 6. 构建花生指纹图谱 1. 遗传多样性的研究 ①姜慧芳等利用 RAPD 技术对 7 个不同植物学 类型的花生种质资源进行了分析 , 在所用 的 83 个随机引物中 ,13 个引物的扩增产物 显示出不同品种间的多态性 , 能显示花生 品种间 DNA 多态性的引物占 15.7%, 这 13 个引物共扩增出 121 条 DNA 带 , 其中具多态 性的片段 26 条 , 占 21.48% 。 1. 遗传多样性的研究 ②叶冰莹等用 RAPD 技术分析了 12 个花生品种 的遗传多样性 , 从 80 个随机引物中筛选出 20 个进行扩增 , 共扩增出 180 条带 , 其中 132 条具有多态性 , 占 73.33% ，平均每个引物 提供 9 个 RAPD 标记的信息量。 ③韩柱强等利用 11 对 SSR 引物对 24 个栽培花 生种 ( 包括 4 大类型 ) 进行 PCR 扩增分析 , 其 中 4 对检测到明显的多态性 , 共检测到 33 个 等位基因变异 , 每一个位点上检测到的变 异数为 5 ~ 13 个 , 平均 8.25 个 , 根据扩增结果 可以将 24 个品种中的 21 个相互区分。 1. 遗传多样性的研究 ④ 陈强等对 32 个来源于中国不同产地的花生 品种进行了 AFLP 指纹图谱及相似性聚类分析。 结果表明 : 所有供试花生品种的遗传相似性 为 35%, 在 45% 的相似性水平上分为 3 个群 表 明中国花生品种存在遗传多态性。 ⑤ 王传堂等研究了分属 3 个