紫外分光光度计和荧光积分球.pdfVIP

前 言： 在中，一个是作为检测器用的光 电倍增管，另一个是作为附件用的 积分球，两者看似没有直接的联系，实际上，积分球的 问世和使用正 是弥补了光电倍增管在检测多样化样品时的自身缺陷。 而对于积分球检测器这种附件，许多仪器使用者了解甚少，甚至没有 听说过。为此，本文针对这两者的关系做一简单介绍，以飨读者。 1．光电倍增管的使用： 光电倍增管英文名称是 photomultiplier tube ，简称 PTM。在目前的一 些双光束分光光度计中经常使用光电倍增管作为检测器。由于光 电倍 增管具有灵敏度高，噪声低及响应速度快的特点，所以被广泛地应用 在许多光学仪器中作为检测器，这是众所周知的常识。 2．光电倍增管的结构： 光电倍增管有 窗式和端窗式两种，在实际应用范围里又以 窗式 居多，因此、本文以 R928 型 窗式光电倍增管为例加以介绍。 R928 型光电倍增管有 11 个电极，分别为：1 个光阴极（Ｋ），9 个倍增极， 也称打拿极（DY）和 1 个阳极（P）；外观图和内部图如图－1，图－2 所 示： 图－1、R928 型光电倍增管外观图 图－2、R928 型光电倍增管内部结构顶视图 3．光电倍增管的简单： 当入射的检测光信号（S/R）照射到光阴极（K）后，光阴极向真空中激发 出光电子。这些光 电子首先进入倍增系统的第一个打拿极 DY1，然后 通过进一步的二次电子发射，逐级通过其余的 8 个打拿极（DY2～ DY9）而得到递增式的倍增放大；最后这些被多次放大后的 电子被阳 极（P）收集作为信号输出。图－3 是 R928 电极排列及供 电电路示意图： 图－3、R928 电极排列及供 电电路示意图 4．光电倍增管灵敏度特性的分析： 虽然光电倍增管有许多优点，但暇不掩玉，该器件自身也有两个致命 的缺陷； ①灵敏度因强光照射（这也就是为何仪器在通 电的情况下样品室盖子 不能打开的原因）或因照射时间过长而降低，停止照射后又部分地恢 复；鉴于光电倍增管的这种特性致使它随着使用时间的累加，灵敏度 会逐渐下降（一般从长波长开始下降，俗称“红外紫移”）且噪声输出却 逐渐加大，直至被弃用。我们把这种现象称为“疲乏效应”。 ②光阴极表面各点的灵敏度不是均匀的，而是根据入射光束的输出 变动而定。 对于第一个缺陷由于有个时间的累积过程，故负面效应在短时间内 不是很凸显；但是对于第二个缺陷，却直接影响着不同样品的在线分析 结果。于是就引出了一个关于光电倍增管灵敏度特性这样一个概念的 分析。 窗型光电倍增管由于光 电面（光窗）的弧形结构及 电极的几何形状 等原因，致使光阴极表面各个位置上的灵敏度是不均匀的，但是造成 这种不均匀的原因不是光阴极表面本身，而是入射光束（或光斑）作用 在光阴极光 电面上不同的位置（locality）所致。形象地说，就是入射光 束照射在光阴极表面上不同的位置会直接影响着阳极灵敏度的高低 （即阳极输出电流的大小），这种特性关系见图－4 所示： 图－4、光电倍增管的灵敏度特性 我们从上面示意图可以看到，入射光束作用在光电倍增管光 电面上 的位置不同会改变其输出的灵敏度；水平位置对灵敏度的影响最为明 显，垂直位置其次。如果入射光束照射在光电面的水平方向的边缘时， 甚至使检测器失去了放大功能，这也就是为何仪器在更换光电倍增管 后需要仔细地调整管子与入射光束的垂直角度和高低的原因。如果有 机会你会发现，许多仪器上的光 电倍增管的光 电面（光窗）不是与入射 光束形成垂直 0°度角，而是有个小小的偏差角度，其原因就是为了寻 找检测器最佳灵敏度位置的结果。 5．不同测试样品对灵敏度的影响： 由于入射光束的强弱变化和检测器灵敏度的变化，故我们在使用分 光光度计之前一般均要做基线校正，这是基本使用常识。 以双光束单检测器的仪器测试液体样品为例：在测试前，两个通道的 比色池内均放置了溶剂调零或做用户基线扫描，注意：这时两个通道 的各种误差（包括光强、折射率、光束照射在检测器光阴极上的位置的 偏差）均得到了校正，然后再测试未知样品。如果样品的浓度及结构 较为简单时，也就是说样品光束与先前作为校正用的溶剂的光束一致 或相近时，测试结果是可信的（这也就是许多使用者经常谈到的吸光值 在 0.7Abs 以下最适合的出处所在）； 可是当被测样品的浓度过高或结构较为复杂（例如浑浊样），此时样品 光束的形状与溶剂光束的形状相差甚远，所测试的结果的可信度就会 大大打折扣的；当样品结构