第十三章微生物学新技术在环境工程中的应用.pptVIP

微生物学新技术： ? 遗传诱变育种 ? 基因工程 ? 酶工程 ? 微生物制剂 ? 生物表面活性剂 第十三章 微生物学新技术在环境工程中的应用 酶（ enzyme ）： ? 高效、专一性强的生物催化剂。 ? 缺点： 稳定性差（容易失活而降低催化能力）、不能重复 使用、纯化困难 。 13.1 固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 一、酶制剂剂型 ? 干燥粗酶制剂 ? 稀液体酶制剂 ? 浓液体酶制剂 ? 干燥粉状酶制剂 ? 固定化酶 13.1 固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 酶是生物界普遍存在的物质， 可以动物、植物和微生物作原料来 提取酶制品。但作为酶制剂工业生 产以微生物最为合适。 二、酶的提取 ? 预处理 ? 胞外酶：存在培养液中，过滤或离心去除菌体，清液即为粗 酶液。 ? 胞内酶：破碎细胞壁和质膜，制成无细胞提取液再提纯。 干燥、机械、超声、冷冻、溶菌酶等 13.1 固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 二、酶的提取 ? 提取 ： 在一定条件下，用适当的溶剂处理含酶原料、使酶充分溶解 到溶剂中的过程。 ? 要充分了解酶的结构、等电点、 pH 、温度的稳定性、氧化还 原剂对酶的影响等 ? 常用提取方法 水溶液提取 表面活性剂提取 丁醇提取 13.1 固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 三、 酶的纯化 ? 使酶与各种杂质分离，达到所需的纯度。 ? 浓缩 ? 去杂质 ? 纯化 ? 结晶 13.1 固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 四、固定化酶和固定化微生物的固定化方法 ? 固定化酶 (immobilized enzyme) 又称水不溶态酶，从筛选、培育获得的优良菌体中提取活性极强的酶，再 用包埋法（或交联法、载体结合法、逆束胶酶反应系统）等方法将酶固定 在载体上，制成不溶于水的，使酶变成不溶于水的固态酶。 13.1 固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 水溶性酶 水不溶性酶 固定化酶 固定化技术 水不溶性载体 四、固定化酶和固定化微生物的固定化方法 ? 固定化微生物 以与固定化酶相同的固定方法将酶活力强的微生物体固定在载体上。 ? 比固定化酶操作简单成本低 ? 固定化细胞比天然细胞稳定性高 ? 催化效率比离体酶高 ? 能完成多步酶反应 ? 固定化微生物能保留某些酶促反应所必需的辅助因子（如 ATP 、 Mg 2+ 、 NAD 等） 13.1 固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 四、固定化酶和固定化微生物的固定化方法 ? 载体结合法 物理吸附、共价结合、离子结合、生物特异结合将酶固定在非水溶性载体上。 常用载体：葡聚糖、活性炭、胶原、琼脂糖、玻璃珠、高岭土、硅胶等。 ? 交联法 将酶与两个或两个以上官能团的试剂（ 双功能或多功能试剂 ）反应形成共价键的固 定方法。 交联剂： 戊二醛 、双重氮联苯胺等 交联法有 2 种形式： 酶直接交联法 如：戊二醛和酶蛋白中的游离氨基发生 Schiff 反应， 酶辅助因子交联 形成 席夫碱 ，从而使酶分子之间相互交联形成固定化酶。 13.1 固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 四、固定化酶和固定化微生物的固定化方法 ? 固定化方法 ? 包埋法 ( 将酶或含酶菌体包埋在各种多孔载体中，使酶固定化的方法 ) 格子型：酶包埋在聚合物的凝胶网格子中，使酶固定。 微胶囊型：半透性的高聚物薄膜包裹固定酶的技术。 13.1 固定化酶和固定化微生物在环境工程中的应用 将酶或含酶菌体包埋在凝胶细微网格中， 制成一定形状的固定化酶 将酶包埋在各种高分子聚合物制成的小球内，制成固定化酶 ? 逆胶束酶反应系统 表面活性剂的两性分子在有机溶剂中自发形成聚集体，其亲水端连 接成逆胶束的极性核，水分子插入核中，疏水性的一端进入主体有机 溶剂中，酶分子溶于逆胶束中，组成逆胶束酶系统。 b a