发根农杆菌介导的药用植物遗传转化.docVIP

点,以甘露糖为多。不同的是前者多为8~14个甘露糖,使产物更加稳定,蛋白质分子量较接近,为85~90kD;后者甘露糖残基多达50~150个,蛋白质分子量差异较大,从100到140 kD。以N-型和O-型糖基化形式进入内质网。N-型糖基化是通过寡聚糖转移酶复合物起始的,而O-甘露糖起始于O-甘露糖转移酶复合物,如甘露糖转移酶Pmt1/Pmt2和Pmt4家族[13]。 此外,酿酒酵母分泌蛋白的末端含α-1,3连接的甘露糖残基,使得糖蛋白的免疫原性增强,不适合于医用;而毕赤酵母表达的糖蛋白糖化位点为(Asn-X-Ser/Thr,与哺乳类细胞糖化位点相同,表达的蛋白能作医用。虽然糖基化对某些外源蛋白的活性没有太大影响,它却可能在蛋白折叠和抗蛋白酶降解中起重要作用。从药物应用的观点来看,不合适的糖基化和寡聚体可能会在机体内产生免疫反应或毒副作用,并且会明显影响纯化过程中产率的提高,因此,选用一种能够获得单体均一形式的基因工程产物十分重要。用于作为治疗的蛋白,可以在原核系统中获得表达,然而大多用于治疗的蛋白需要经过转录后的修饰加工而获得全生物学功能的蛋白[14]。N-糖基化对于很多蛋白的正确折叠、药物动力学的稳定性和功效非常重要[15]。此外,蛋白质在分泌过程中还可形成正确二硫键、切除信号肽及其它片段以及发生正确的折叠,最终形成有生物学功能的蛋白质。 8　毕赤酵母系统的应用前景 8.1　表达具