药典无菌检查法.pdf

附录Ⅻ A 无菌检查法 无菌检查法系用于检查药典要求无菌的生物制品、医疗器具、原料、辅 料、及其他品种是否无菌的一种方法。若供试品符合无菌检查法的规定,仅 表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染 无菌检查应在环境洁净度 10 000 级下的局部洁净度 100 级的单向流 空气区域内或隔离系统中进行，其全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物 污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出 单向流空气区、工 作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的 测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。隔离系统应按相关的要求进行 验证，其内部环境的洁净度 符合无菌检查的要求。日常检验还需对试验环 境进行监控 无菌检查人员必 具备微生物专业知识，并经过无菌技术的培训 培养基 培养基的制备 培养基可按以下处方制备，亦可使用按该处方生产的符合规定的脱水 培养基。配制后应采用验证合格的灭菌程序灭菌。制备好的培养基应保存在 2℃～ 25℃、避光的环境，若保存于非密闭容器中，一般在三周内使用；若保 存于密闭容器中，一般可在一年内使用 1. 硫乙醇酸盐流体培养基 酪 胨 (胰 酶 水 解 ) 15.0g 酵 母 浸 出 粉 1 5.0g 葡 萄 糖 5.0g 氯 化 钠 2.5g L-胱氨酸 0.5g 新配制的 0.1% 刃天青溶液 1.0 ml 硫 乙 醇 酸 钠 0.5g 琼 脂 0.75g (或 硫 乙 醇 酸 ) （ 0.3 ml) 水 1000 ml 除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解，调节 pH 为弱 碱性，煮沸，滤清，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节 pH 值使灭菌后 为 7.1 ± 0.2 。分装至适宜的容器中，其装量与容器高度的比例应符合培养 结束后培养基氧化层（粉红色）不超过培养基深度的 1/2 ，灭菌。在供试品接 种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的 1/5 ，否则，须经 100 ℃水浴加热至粉红色消失（不超过 20 分钟），迅速冷却，只限加热一次，并 防止被污染 2.改良马丁培养基 胨 5.0g 磷酸氢二钾 1.0g 酵母浸出粉 2.0g 硫酸镁 0.5g 葡萄糖 20.0g 水 1000 ml 2 除葡萄糖外，取上述成分混合，微温溶解，调节 pH 值约为 6.8 ，煮沸， 加入葡萄糖溶解后，摇匀，滤清，调节 pH 值使灭菌后为 6.4 ±